загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня Наступна »

Рестрикція геномної ДНК

Для рестрикції геномної ДНК ми використовували два типи ендонуклеаз рестрикції (далі рестріктази - табл .1). На першому етапі певну кількість ДНК з нормальної і пухлинної тканин інкубували з рестриктазою, що не містить в складі свого сайту рестрикції CpG динуклеотид. Потім відбирали половину або одну третину обробленої таким чином ДНК і додавали до неї рестриктазою, чутливу до статусу метилювання CpG динуклеотидів у складі свого сайту рестрикції. Надалі аліквоту рестріцірованной ДНК використовували в реакції ампліфікації. Всі рестріктази використовували з 5 кратним надлишком (1 мкг ДНК - 5 од. Ферменту) і інкубували з ДНК протягом 14-16 ч. У разі метілчувствітельних рестриктаз обробку проводили у два етапи, з додаванням на другому етапі половини початкового кількості ферменту і инкубированием в протягом 3-4 ч.
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна "Рестрикція геномної ДНК"
  1. ГОЛОВНИЙ КОМПЛЕКС ГЕНОВ гістосумісності
    Чарлз Б. Карпентер (Charles В. Carpenter) Антигени, що забезпечують внутрішньовидові відмінності особин, позначаються як аллоантігени, а коли вони включаються в процес відторгнення алогенних тканинних трансплантатів, то набувають назву антигенів тканинної сумісності (гістосумісності). Еволюція закріпила одиничний ділянку тісно зчеплених генів гістосумісності, продукти яких на
  2. Пошук CpG-острівців, гіперметілірованних в пухлинах шийки матки
    Принцип методу метілчувствітельной ПЛР із статистичними GC-багатими праймерами . Завданням нашого дослідження було виявлення CpG-острівців, метильованих в пухлинах шийки матки. Для її вирішення ми використовували метод метілчувствітельной ПЛР із статистичними GC-багатими праймерами (СП-ПЛР) (Gonsalgo et al. 1997). Принцип методу полягає в наступному. ДНК з двох порівнюваних зразків (в
  3. Дослідження експресії і статусу метилювання гена Р3А-адаптіна при раку шийки матки
    Після встановлення повного розміру CpG-острівця гена вза-адаптіна ми провели дослідження взаємозв'язку між метилированием цього CpG-острівця і транскрипцією асоційованого з ним гена. Як відомо, метилирование CpG-острівця зазвичай супроводжується інактивацією транскрипції (див. розділ "Метилирование ДНК"). Тому завданнями нашого дослідження на даному етапі були вивчення рівня експресії
  4. МЕДИЧНА ІМУНОЛОГІЯ
    Тема: Імунологія як наука про способи і механізми захисту від генетично чужорідних речовин з метою підтримання гомеостазу організму Виникнення і становлення імунології як науки, етапи формування імунології. Роль вітчизняних і зарубіжних вчених у розвитку імунології, нобелівські лауреати в галузі імунології. Основні напрямки сучасної імунології: клітинна, молекулярна,
  5. Тема: ВІРУСИ - збудників інфекційних хвороб ЛЮДИНИ
    4.1. ДНК-геномні віруси. 4.1.1. поксвирусов (сімейство Poxviridae). Загальна характеристика і класифікація. Вірус натуральної віспи. Структура віріона. Антигени. Культивування. Чутливість до дії хімічних і фізичних факторів. гемаглютинації. Патогенетичні особливості захворювання. Лабораторна діагностика. Внутрішньоклітинні включення (тільця Гварніері). Специфічна
  6. 3. ПИТАННЯ ДО ІСПИТУ
    Розділ 1. Загальна частина Морфологія мікроорганізмів 1. Основні принципи класифікації мікробів. 2. Морфологічні та тинкторіальні властивості бактерій . Методи забарвлення. 3. Структура та хімічний склад бактеріальної клітини. Особливості будови грампозитивних і грамнегативних бактерій. 4. Морфологія грибів. Принципи класифікації. 5. Морфологія найпростіших. Принципи
  7. КОМБІНОВАНІ ГОРМОНАЛЬНІ КПК (КОК)
    Комбіновані пероральні контрацептиви (КОК) відносяться до найбільш поширених методів регуляції народжуваності і містять у своєму складі естроген ний і геста-генний компоненти. Як естрогенного компонента КОК використовується синтетичний естроген етинілестрадіол (ЇЇ), в якості прогестагенного - різні синтетичні прогестагени. Нині КОК користуються великою
  8. онкоген І неопластичними ЗАХВОРЮВАННЯ
    Поль Нейман (Paul Neiman) При розподілі ракові клітини передають дочірнім клітинам неопластичний фенотип. Але цієї причини отримало загальне поширення думка про те, що спадкування неопластичного фенотипу зумовлюється специфічними генами. Це припущення пояснює надзвичайний інтерес дослідників-онкологів до онкогенних вірусів. Незважаючи на порівняльну генетичну
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...