Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
ГоловнаМедицинаОнкологія
« Попередня
Лекції. Матеріали XIV Російського онкологічного конгресу, 2010 - перейти до змісту підручника

РОЗРОБКА ПРОТИПУХЛИННИХ ПРЕПАРАТІВ НА ОСНОВІ РЕКОМБІНАНТНОГО цитокінів TRAIL І ЙОГО МУТАНТІВ DR5-A І DR5-B З ПІДВИЩЕНОЇ специфічність до рецепторів СМЕРТІ DR5

Яголовіч А.В.1, Гаспарян М.Е.2

1 Кафедра біоінженерії біологічного факультету МГУ им.М.В.Ломоносова;

2 Інститут біоорганічної хімії ім.М.М.Шемякіна і Ю.А.Овчіннікова РАН



Завдання дослідження: Розробка методів отримання рекомбінантного цитокіну TRAIL і його рецептор-специфічних мутантів з підвищеною специфічністю до рецептора DR5 і дослідження протипухлинної активності препаратів на лініях ракових клітин.

Матеріали і методи: Ген TRAIL збирали за допомогою ПЛР. Мутації вводили методом сайт-направленого мутагенезу. Експресію білків проводили в штамі E. coli BL21 (DE3). Очищення проводили методом Ni-афінної хроматографії. Константи дисоціації для зв'язування варіантів TRAIL з рецепторами визначали методом поверхневого плазмонного резонансу. Протипухлинну активність препаратів досліджували на лініях ракових клітин HeLa, Jurkat, K562 і U937.

Результати: В роботі розроблені ефективні методи отримання рекомбінантних препаратів TRAIL і нових DR5-специфічних мутантів DR5-A і DR5-B. Розроблені методи дозволяють очистити до 300 мг високоактивного TRAIL з 1 л культури клітин. Отриманий препарат рекомбінантного цитокіну TRAIL ефективно індукував апоптоз в лінії ракових клітин HeLa і демонстрував відсутність токсичності на первинних фібробластах шкіри і на мишах. Нові мутанти DR5-A і DR5-B, отримані на основі раніше описаних мутантів DR5-8 і D269H, мали високу афінність до рецептора DR5, при цьому не зв'язувалися з DR4 і DcR1, а їх спорідненість до DcR2 і OPG було в 20 і 100 разів нижче, відповідно, в порівнянні з TRAIL дикого типу. У клітинах HeLa варіанти DR5-A і DR5-B индуцировали апоптоз в кілька разів ефективніше TRAIL дикого типу. У DR4-залежних клітинах К562 варіанти DR5-A і DR5-B мали знижену ефективність.
Ефективність DR5-A і DR5-B в DR5-залежних клітинах Jurkat і U937 була значно вище в порівнянні з диким типом та іншими варіантами TRAIL.

Висновки: Розроблена методика отримання протипухлинного цитокіну TRAIL з високим виходом білка дозволяє розглядати препарат як потенційне протипухлинний засіб. Нові DR5-специфічні мутантні варіанти TRAIL DR5-A і DR5-B володіють найбільшою специфічністю до рецептора DR5 в порівнянні з раніше описаними мутантними варіантами. Крім того, варіанти DR5-A і DR5-B у кілька разів ефективніше викликають апоптоз в DR5-чутливих лініях ракових клітин в порівнянні з TRAIL дикого типу, що робить їх потенційними кандидатами для терапії TRAIL-резистентних пухлин.
« Попередня
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна" РОЗРОБКА ПРОТИПУХЛИННИХ ПРЕПАРАТІВ НА ОСНОВІ РЕКОМБІНАНТНОГО цитокінів TRAIL І ЙОГО МУТАНТІВ DR5-A І DR5-B З ПІДВИЩЕНОЇ специфічність до рецепторів СМЕРТІ DR5 "
  1. Тема: бактеріологія, мікології, протозоологов
    розробки індивідуальних раціональних схем антибіотикотерапії для хворих хронічними інфекціями з використанням гнотобіологіческой технології. Антибіотики вибору, спрямовані проти облігатних неспорооб-разующіх анаеробних мікроорганізмів. Схеми раціональної антибіотикотерапії при змішаній інфекції, викликаної аеробами, факультативними анаеробами і облігатними анаеробами. Побічна
  2. Хронічний мієлолейкоз
    протипухлинний антибіотик рубомицина гідрохлорид). Курси поліхіміотерапії короткі (5-14 днів з перервами в 7-10 днів). - В даний час з'явилися принципово нові методи ліку ня ХМЛ - цитокін а-інтерферон (а-ІФН). Справа в тому, що в процесі мієлоїдної проліферації мегакаріоцити і тромбоцити виділяють біль ШОЕ кількість ростових факторів, які самі по собі сприяють
  3. ОСНОВИ неоплазією
    розробки представляються можливими, оскільки розуміння раку як патологічного процесу підкріплюється новими знаннями про нього як про набутий генетичному порушенні. Це глава являє собою огляд біології, етіології і клінічних проявів неопластичного процесу, слідом за яким дається опис загальноприйнятих методів діагностики раку, визначення його стадії або ступеня
  4. ОСНОВИ ПРОТИПУХЛИННОЇ ТЕРАПІЇ
    розробках терапії раку. З розвитком гібридомної техніки з 1975 р. отримано велику кількість моноклональних антитіл до пухлиноасоційованих антигенів при раку товстої кишки, легенів, підшлункової залози, меланоми, лейкозах і лімфомах. Необхідні подальші клінічні випробування для з'ясування ролі цих антитіл в якості самостійних лікувальних агентів або пов'язаних з токсинами (наприклад, з
  5. хвороба Ходжкіна І Лімфоцитарна ЛІМФОМИ
    розробки терапевтичних підходів. У 1/3 хворих у віддаленій при лапаротомії селезінці, розміри якої знаходилися в межах норми, була виявлена ??специфічна патологія, і, навпаки, у 25% хворих в збільшеній селезінці пухлинний процес не був виявлений, а спленомегалія була обумовлена ??реактивної гіперплазією. Збільшення селезінки при хворобі Ходжкіна пов'язували з залученням в процес
  6. ОБМІН кальцію, фосфору і кісткової тканини: кальційрегулюючих ГОРМОНИ
    розробку і впровадження методів визначення метаболітів вітаміну D в крові для підтвердження підозрюваних порушень його метаболізму , а також створення більш активних аналогів вітаміну D, придатних для клінічного застосування. Фотобіогенез вітаміну D Вітамін D3 - це похідне 7-дегідрохолестеріна (провітамін D3), найближчого попередника холестерину. При експозиції шкіри до
  7. Лікування дилатаційною кардіоміопатії
    препарати. Абстиненція набуває особливого значення при алкогольної КМП. У значної частини таких хворих вона дозволяє помітно поліпшити прогноз. У 1963 р. G. Burch з співавторами запропонував призначати хворим ДКМП строгий постільний режим. Згідно з отриманими даними, тривала (протягом 6-12 міс) іммобілізація, сприяючи зниженню роботи серця і його потреби в кисні, майже в половині
  8. Нові та експериментальні методи лікування розсіяного склерозу
    розробка та оптимізація практичних критеріїв призначення препаратів оральних ензимів хворим на розсіяний склероз при різних стадіях і формах захворювання, а також залежно від фонових імунологічних показників. Трансплантація ембріональної нервової тканини. Останніми роками активно розробляється принципово новий підхід до лікування великої групи захворювань ЦНС
  9. 3.2. РЕВМАТОЇДНИЙ АРТРИТ
    розробці знаходяться рекомбінантний розчинний ФНП-a рецептор і рекомбінантний рецепторний антагоніст ІЛ-1. Місцеве лікування: - Внутрішньосуглобове введення лікарських засобів (бетаметазон, кеналог). - Аплікації 10 -15 мл 50% розчину димексиду - тривалість процедури 20-30 хв, для посилення знеболюючого і протизапального ефекту можна додати анальгін (0,5 г), гідрокортизон
  10. Біологічно активні білки вірусу грипу. Активність транскриптази в клітинах і вирионах грипу
    розробці ефективних хіміотераяевтіческіх підходів для контролю за МВК-совірусной інфекцією людини і тварин. ЛІТЕРАТУРА Aaslested HG, Clark HF, Bishop DHL, Koprowski HJ Virol .. 1971 Ada GL, Perry В. Т. J. gen. Microbiol., 1956, v. 14, p. 623. Auld DS, Kawaguchi DM, Livingston DM, Vallee BL Proc. nat. Acad. Sci. US, 1974, v. 71, p . 2091.
© medbib.in.ua - Медична Бібліотека