загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня Наступна »

. Розбавлення, зберігання і транспортування сперми Значення і необхідність розбавлення сперми

Під час еякуляції до вмісту епідідіміса домішуються секрети придаткових статевих залоз. Вони змінюють рН середовища, насичують плазму електролітами (солі натрію, калію, магнію); останні викликають руйнування липопротеидного покриву сперміїв. Зазначені зрушення зумовлюють перехід сперміїв з анабіозу в активний стан; це, в свою чергу, призводить до швидкої їх загибелі.

Безпосередніми причинами скорочення терміну життя сперміїв поза організмом є:

- виснаження джерел енергії в спермальної плазмі і самих сперміях;

- інтоксикація продуктами життєдіяльності сперміїв;

- руйнування липопротеидного покриву, набухання мембран і зняття електричного заряду;

- негативна дія знаходяться в спермі і розмножуються в ній мікроорганізмів;

- температурні перепади.

Отже, для продовження терміну життя сперміїв у зовнішньому середовищі потрібно:

- зменшити активність сперміїв;

- забезпечити їх додатковими джерелами енергії ;

- захистити мембрани сперміїв від руйнування;

- запобігти накопиченню токсичних продуктів метаболізму;

- блокувати розмноження знаходяться в спермі мікроорганізмів;

- підвищити стійкість сперміїв до температурних перепадів і криогенним впливів.

Це досягається застосуванням спеціальних розріджувачів.

Крім захисних функцій, розбавлення сперми полегшує дроблення еякуляту на порції (спермодози). Це особливо істотно для тварин з маточним типом природного запліднення (свині, коні), оскільки спермодоза поряд з нормативним числом рухомих сперміїв повинна бути досить об'ємною.

Синтетичні та біологічні середовища для зберігання сперми

Розріджувачі можуть бути біологічними і синтетичними (штучними) середовищами. З біологічних середовищ використовувалося коров'яче молоко, кокосове молоко, 7%-ний розчин бджолиного меду, а також томатний сік.

Застосовувані нині розріджувачі сперми сільськогосподарських тварин відносять до синтетичних середовищ.

Синтетична середу зазвичай складається з трьох і більше компонентів, наприклад, глюкозо-цитратно-желточная середу (ГЦЖ).

Основні компоненти розріджувачів і їх роль

До складу більшості розріджувачів входять наступні компоненти:

Сахара (глюкоза, лактоза). Служать джерелом енергії для сперміїв. Крім цього вони беруть участь у підтримці осмотичного тиску, знижують електропровідність середовища, оберігають спермії від втрат електричного заряду.

Цитрат натрію. Створює буферність середовища, нейтралізує кінцеві продукти життєдіяльності сперміїв, пов'язуючи іони кальцію і важких металів.

Тріс-буфер (2-аміно-2-гідроксиметил-1, пропандіол). Стійко утримує первісну рН середовища, володіє осмотическим дією, усуває явища дихального ацидозу в сперміях.

Трілон Б (хелатон, двонатрієва сіль етилендіамін-тетраоцтової кислоти). Утворюючи тимчасові зв'язки з іонами кальцію, гальмує активність протеаз, АТФаз та інших ферментів, що беруть участь в метаболічних процесах в сперміях.

ЕДТА (трінатріевая сіль етилендіамінтетраоцтової кислоти). Подібно трилону Б, утворює хелатні комплекси з іонами кальцію, тим самим блокує активність ферментних систем сперміїв.

Сульфат амонію. Охороняє від руйнування сульфо-гідрільние групи в мембранах сперміїв, затримує вихід електролітів в навколишнє середовище.
трусы женские хлопок


Гліцерин. Володіє кріопротекторними властивостями, легко проникає всередину спермия, знижує температуру замерзання і перешкоджає утворенню кристалів зв'язаної води, що дозволяє уникнути пошкоджень клітинних структур. Завдяки високій гідрофільності перешкоджає дегідратації цитоплазми.

Жовток курячих яєць. Містить лецитин і ліпопротеїни, які створюють на поверхні спермия адсорбційний шар, що оберігає його від холодового шоку.

Спермосан ППК. Комплексний антибактеріальний препарат, що з пеніциліну, поліміксину, канамицина. Така комбінація ефективно гальмує розмноження мікроорганізмів у спермі.

До складу деяких розріджувачів входять антиоксиданти (токоферол), загусники (гуміарабік), вільні амінокислоти (глікокол, аргінін) і інші компоненти.

Санітарно-гігієнічні вимоги до приготування середовищ і розбавленню сперми

Для приготування середовищ і розбавлення сперми відводять спеціально обладнане лабораторне приміщення із засобами стерилізації повітря і предметів (бактерицидні лампи).

Колби, мірні циліндри, піпетки, паперові фільтри та інші приналежності напередодні взяття сперми стерилізують у сушильній шафі при температурі 130-150оС; перед використанням їх переносять у термостат з постійною температурою 37-36оС.

Для приготування середовищ використовують дистильовану воду, що має рН 6,8-7,0. Придатні тільки хімічно чисті і перевірені на нешкідливість для сперміїв сухі компоненти. Їх зберігають у герметично закритих скляних банках у темному місці. Яйця використовують тільки свіжі (з терміном зберігання до 7 діб), отримані від здорових курей при вигульному їх утриманні.

Зберігання сперми при температурі +2 ... +5 ° С

Сперму, що зберігається при +2 ... +5 ° С, розбавляють глюкозоцітратножелточной, молочно-желточной, глюкозоцітратножелточной з хелатоном і аргініном, глікоколцітратножелточной середовищами.

Після розведення сперму розфасовують в одноразові стерильні поліетиленові ампули, поліетиленові пробірки або у флакони з-під антибіотиків; їх обгортають теплоізолюючим матеріалом (для поступового охолодження), укладають в поліетиленовий пакет. Пакети з розфасованої спермою вкладають у шірокогорлую термос з льодом або поміщають на полицю побутового холодильника. Сперму бугаїв і кнурів використовують протягом трьох діб, барана - протягом доби.

Зберігання сперми при температурі +16 ... +20 ° С

Вандемарк і Шарма з Іллінойського університету (США) в 1957 р. повідомили про розроблений ними методі короткострокового зберігання сперми биків без охолодження. Для іммобілізації сперміїв вони застосовували вугільну кислоту, яку отримували за допомогою насичення вуглекислим газом спеціального розріджувача (ІХТ) до величини рН 6,3-6,35. Розбавлену сперму зберігали в запаяних скляних ампулах, заповнених на 2/3 об'єму, при 18-20 ° С. Сперма була придатна для осіменіння протягом 3 діб.

У середовищі, запропонованої А.А. Зальцманом (ТВТ-12), вугільна кислота була замінена на лимонну кислоту.

Короткострокове зберігання сперми при плюсових температурах шляхом блокування метаболічних процесів в спермі-ях засноване на використанні трилону Б (хелатона). Середовища з хелатоном отримали широке застосування в практиці штучного осіменіння свиней. Найбільш ефективною виявилася глюкозо-хелато-цитратно-сульфатна середу (ГХЦС-середовище).


Розбавлену ГХЦС-середовищем сперму зберігають і використовують протягом 3 діб.

Заморожування та зберігання сперми при температурі -196 ° С в рідкому азоті

Для заморожування придатна сперма бика з активністю сперміїв не нижче 8 балів і концентрацією їх не менше 0, 8 млрд в 1 мл.

Заморожують сперму биків у гранулах (0,1-0,2 мл). Ця розфасовка забезпечує більш ефективне використання судин Дьюара для зберігання сперми, трохи кращу виживаність і здатність до запліднення сперміїв. Після оцінки сперму розбавляють середовищем № 1 (11%-ний розчин лактози - 63 мл, жовтка - 30 мл, гліцерину - 7 мл) у співвідношенні 1:1, потім середовищем № 2 (11%-ний розчин лактози - 81,5 мл , жовтка - 15 мл, гліцерину - 3,5 мл), доводять ступінь розведення до потрібного показника. Для заморожування сперми гранулами по 0,5-1 мл використовують середовище: вода дистильована - 100 мл, лактоза - 11,5 г, жовток курячого яйця - 20 мл, гліцерин - 5 мл.

Після розведення сперму охолоджують при +2 ... +5 оС протягом 4-7 ч. Потім беруть фторопластову пластину, на якій з двох сторін є по 300-324 лунки для накопичення сперми, знезаражують її за допомогою бактерицидних ламп, опускають в шірокогорлую посудину з рідким азотом і охолоджують до тих пір, поки припиниться кипіння азоту. Охолоджену пластинку піднімають над поверхнею рідкого азоту і за допомогою шприца наносять розведену сперму об'ємом по

0,1 мл у кожну лунку. Через 2-3 хвилин після нанесення сперми в останню лунку, пластинку занурюють у рідкий азот на 1-2 хв. Після цього, вийнявши пластинку, заморожені гранули збирають у пластмасові коробочки з невеликими отворами (або в марлеві мішечки) і зберігають їх в рідкому азоті. Головним недоліком заморожування сперми в гранулах є їх незахищеність.

Під керівництвом Ф.І. Осташко розроблена Харківська технологія заморожування сперми в облицьованих (покритих тонкою полімерною плівкою) гранулах. У Франції воліють швидко заморожувати сперму в пайєтах («соломинках»), які одночасно служать інструментом для осіменіння корів. Для заморожування сперми в пайєтах за французькою технологією (професор Касу) використовують середовища «Леціфос» і «Кріоціфос». Розфасовують сперму в пайєти об'ємом 0,5 мл.

Для розбавлення і заморожування сперми по Байсогаль-ської технології (Литовська технологія) використовують середу ЛЦГЖС. Розфасовують сперму в пайєти об'ємом 0,25 мл з розрахунком, щоб після відтавання в дозі сперми містилося не менше 15 млн рухомих сперміїв.

Тривалість зберігання замороженої сперми в рідкому азоті на племпідприємства здійснюють у спеціальних приміщеннях (сховищах), в яких встановлені стаціонарні ємності ХБ-0, 5 або КВ-6202.

Транспортують сперму і зберігають на пунктах штучного осіменіння в судинах Дьюара різної ємності (від 4 до 50 л рідкого азоту).

Азот доставляється на пункти штучного осіменіння в транспортних резервуарах, встановлених на автомобілях високої прохідності.

Розморожування сперми, що зберігається в рідкому азоті (при температурі -196 ° С)

Режим відтавання замороженої сперми наведено в таблиці 2.

Таблиця 2 Розморожування сперми



« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна ". Розбавлення, зберігання і транспортування сперми Значення і необхідність розбавлення сперми"
  1. А
    список А, група отруйних високо токсичних лікарських засобів, що передбачається Державною фармакопеєю СРСР; доповнюється і змінюється наказами Міністерства охорони здоров'я СРСР. При поводженні з цими лікарськими засобами необхідно дотримуватися особливої ??обережності. Медикаменти списку зберігаються в аптеках під замком в окремих шафах з написом «А - venena» (отруйні). Перед закриттям
  2. И
    + + + голкотерапія, акупунктура, чжень-цзю-терапія, метод лікування уколами за допомогою голок. Сутність І. полягає в рефлекторному впливі на функції органів з лікувальною метою різними за силою, характером і тривалості уколами. Кожна точка уколу пов'язана каналами (лініями) з певним органом. У тварин таких каналів 14 (рис. 1). Для І. користуються спеціальними голками (рис. 2).
  3. К
    + + + Каверна (від лат. Caverna - печера, порожнина), порожнина, що утворюється в органах після видалення некротичної маси. К. виникають (наприклад, при туберкульозі) в легенях. К. можуть бути закритими і відкритими при повідомленні їх з природним каналом. Див також Некроз. + + + Кавіози (Khawioses), гельмінтози прісноводних риб, що викликаються цестодами роду Khawia сімейства Garyophyllaeidae,
  4. М
    + + + магнезія біла, те ж, що магнію карбонат основний. + + + Магнезія палена, те ж, що магнію окис. магнію карбонат основний (Magnesii subcarbonas; ФГ), магнезія біла, в'яжучий і антацидний засіб. Білий легкий порошок без запаху. Практично не розчиняється у воді, що не містить вуглекислоти, розчинний у розведених мінеральних кислотах. Застосовують зовнішньо як присипку, всередину -
  5. Н
    + + + гній, цінне органічне добриво, що складається з екскрементів тварин, рідких відходів ферм і підстилкового матеріалу (солома, торф, тирса). Н. містить велику кількість мінеральних і органічних речовин, внесення яких в грунт підвищує її поживні властивості. Залежно від методу утримання тварин та системи збирання приміщення розрізняють Н. рідкий, напіврідкий і твердий. Рідкий
  6. С
    + + + сабур (тур. sabur), висушений сік листя рослини алое (Aloe arborescens) сімейства лілійних; проносний засіб. Темно-бурі шматки або порошок. Добре розчинний у гарячій воді, спирті, розчинах лугів. Діючі початку - антрагликозиди (алоин). У малих дозах діє як гіркота, покращуючи апетит і посилюючи травлення, желчегонно. Місцево чинить слабку подразнюючу,
  7. Організація штучного осіменіння тварин
    Організація роботи зі штучного осіменіння тварин у Російській Федерації Організаційну структуру служби штучного осіменіння очолює Департамент з племінної роботи Міністерства сільського господарства Російської Федерації. У кожному суб'єкті Російської Федерації роботу щодо штучного осіменіння очолюють обласні або крайові департаменти по племінній роботі. У їх
  8.  Повільної інфекції ТВАРИН
      Вони характеризуються тривалим інкубаційним періодом, тривалим клінічним перебігом, неминуче призводить до летального результату. Збудники: віруси, які позначають як нетрадиційні. Вони володіють незвичайними фізичними і хімічними властивостями, біологічно відрізняються від інших інфекційних збудників, поширені в багатьох країнах світу, завдають великої економічної шкоди.
  9.  Хламідійна інфекція
      Уолтер Е. Стемм, Кінг К. Холмс (Walter Е. Stamm, King К. Holmes) Рід Chlamydia об'єднує два види - С. psittaci і С. trachomatis, С. psittaci широко поширена в природі, зумовлює розвиток генітальних, кон'юнктивальних, кишкових або респіраторних інфекцій у багатьох ссавців і птахів. Викликані С. psittaci генітальні інфекції у деяких видів тварин були докладно описані;
  10. В
      + + + Вагіна штучна (лат. vagina - піхва), прилад для отримання сперми від виробників сільськогосподарських тварин. Метод застосування В. і. заснований на використанні подразників статевого члена, замінюють природні подразники піхви самки, для нормального прояви рефлексу еякуляції. Такими подразниками в В. і. служать певна температура (40-42 {{?}} C) її стінок,
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...