Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
ГоловнаМедицинаВірусологія
« Попередня Наступна »
H. В. Прозоркіна, П. А. Рубашкіна. Основи мікробіології, вірусології та імунології, 2002 - перейти до змісту підручника

Живильні середовища і мікробіологічне дослідження

Мікробіологічне дослідження - це виділення чистих культур мікроорганізмів, культивування та вивчення їх властивостей . Чистими називаються культури, що складаються з мікроорганізмів одного виду. Вони потрібні при діагностиці інфекційних хвороб, для визначення видової і типової приналежності мікробів, у дослідницькій роботі, для отримання продуктів життєдіяльності мікробів (токсинів, антибіотиків, вакцин і т. п.).

Для культивування мікроорганізмів (вирощування в штучних умовах in vitro) необхідні особливі субстрати - поживні середовища. На середовищах мікроорганізми здійснюють всі життєві процеси (харчуються, дихають, розмножуються і т. д.), тому їх ще називають «середовищами для культивування».

Живильні середовища

Живильні середовища є основою мікробіологічної роботи, і їх якість нерідко визначає результати всього дослідження. Середовища повинні створювати оптимальні (найкращі) умови для життєдіяльності мікробів.

Вимоги, що пред'являються до середах

Середовища повинні відповідати таким умовам:

1) бути поживними, тобто містити в легко засвоюваному вигляді всі речовини, необхідні для задоволення харчових і енергетичних потреб. Ними є джерела органогенов і мінеральних (неорганічних) речовин, включаючи мікроелементи. Мінеральні речовини не тільки входять в структуру клітини і активізують ферменти, а й визначають фізико-хімічні властивості середовищ (осмотичний тиск, рН та ін.) При культивуванні ряду мікроорганізмів в середовища вносять фактори росту - вітаміни, деякі амінокислоти, які клітина не може синтезувати;

Увага! Мікроорганізми, як усі живі істоти, мають потребу у великій кількості води.

2) мати оптимальну концентрацію водневих іонів - рН, так як тільки при оптимальній реакції середовища, що впливає на проникність оболонки, мікроорганізми можуть засвоювати живильні речовини.

Для більшості патогенних бактерій оптимальна слабощелочная середу (рН 7,2-7,4). Виняток становлять холерний вібріон - його оптимум знаходиться в лужному зоні

(рН 8,5-9,0) і збудник туберкульозу, який потребує слабокислою реакції (рН 6,2-6,8).

Щоб під час росту мікроорганізмів кислі або лужні продукти їх життєдіяльності не змінили рН, середовища повинні володіти буферностью, тобто містити речовини, що нейтралізують продукти обміну;

3 ) бути Ізотонічність для мікробної клітини, тобто осмотичний тиск у середовищі має бути таким же, як всередині клітини. Для більшості мікроорганізмів оптимальна середу, відповідна 0,5% розчину натрію хлориду;

4) бути стерильними, так як сторонні мікроби перешкоджають росту досліджуваного мікроба, визначенню його властивостей і змінюють властивості середовища (склад, рН та ін
);

5) щільні середовища повинні бути вологими і мати оптимальну для мікроорганізмів консистенцію;

6) володіти певним окисно -відновним потенціалом, тобто співвідношенням речовин, які віддають і приймають електрони, висловлюваним індексом RH2. Цей потенціал показує насичення середовища киснем. Для одних мікроорганізмів потрібен високий потенціал, для інших - низький. Наприклад, анаероби розмножуються при RH2 не вище 5, а аероби - при RH2 не нижче 10. Окислювально-відновний потенціал більшості середовищ задовольняє вимогам до нього аеробів і факультативних анаеробів;

7) бути по можливості уніфікованим, тобто містити постійні кількості окремих інгредієнтів. Так, середовища для культивування більшості патогенних бактерій повинні містити 0,8-1,2 гл амін-ного азоту NH2, тобто сумарного азоту аміногруп амінокислот і нижчих поліпептидів; 2,5-3,0 гл загального азоту N; 0, 5% хлоридів у перерахунку на натрію хлорид; 1% пептону.

Бажано, щоб середовища були прозорими - зручніше стежити за зростанням культур, легше помітити забруднення середовища сторонніми мікроорганізмами.

Класифікація середовищ

Потреба в поживних речовинах і властивості середовища у різних видів мікроорганізмів неоднакова. Це виключає можливість створення універсальної середовища. Крім того, на вибір тієї чи іншої середовища впливають мети дослідження.

В даний час запропоновано величезна кількість середовищ, в основу класифікації яких покладено такі ознаки.

1. Вихідні компоненти. За вихідними компонентами розрізняють натуральні і синтетичні середовища. Натуральні середовища готують з продуктів тваринного і рослинного походження. В даний час розроблені середовища, в яких цінні харчові продукти (м'ясо та ін) замінені нехарчовими: кісткової і рибним борошном, кормовими дріжджами, згустками крові та ін Незважаючи на те, що склад поживних середовищ з натуральних продуктів дуже складний і змінюється в залежності від вихідної сировини, ці середовища знайшли широке застосування.

Синтетичні середовища готують з певних хімічно чистих органічних і неорганічних сполук, взятих в точно зазначених концентраціях і розчинених у двічі дистильованої воді. Важлива перевага цих середовищ в тому, що склад їх постійний (відомо, скільки і які речовини в них входять), тому ці середовища легко відтворювані.

2. Консистенція (ступінь щільності). Середовища бувають рідкі, щільні і напіврідкі. Щільні і напіврідкі середовища готують з рідких речовин, до яких для отримання середовища потрібної консистенції додають зазвичай агар-агар або желатин.

Агар-агар - полісахарид, одержуваний з певних сортів морських водоростей. Він не є для мікроорганізмів живильною речовиною і служить тільки для ущільнення середовища.
У воді агар плавиться при 80 - 100 ° С, застигає при 40-45 ° С.

Желатин - білок тваринного походження. При 25 - 30 ° С желатинові середовища плавляться, тому культури на них зазвичай вирощують при кімнатній температурі. Щільність цих середовищ при рН нижче 6,0 і вище 7,0 зменшується, і вони погано застигають. Деякі мікроорганізми використовують желатин як поживна речовина - при їх зростанні середу розріджується.

Крім того, в якості щільних середовищ застосовують згорнуту сироватку крові, згорнуті яйця, картопля, середовища з Селикагель.

3. Склад. Середовища ділять на прості і складні. До перших відносять мясопептонний бульйон (МПБ), мясопептонний агар (МПА), бульйон і агар Хоттингера, живильний желатин і пептони воду. Складні середовища готують, додаючи до простих середах кров, сироватку, вуглеводи та інші речовини, необхідні для розмноження того чи іншого мікроорганізму.

4. Призначення: а) основні (загальновживані) середовища служать для культивування більшості патогенних мікробів. Це вищезгадані МП А, МПБ, бульйон і агар Хоттингера, пептонна вода, б) спеціальні середовища служать для виділення і вирощування мікроорганізмів, що не ростуть на простих середовищах. Наприклад, для культивування стрептокока до середовищ додають цукор, для пневмо-і менінгококів - сироватку крові, для збудника коклюшу - кров; в) елективні (виборчі) середовища служать для виділення певного виду мікробів, зростанню яких вони сприяють, затримуючи або пригнічуючи ріст супутніх мікроорганізмів . Так, солі жовчних кислот, пригнічуючи ріст кишкової палички, роблять середовище елективної для збудника черевного тифу. Середовища стають елективних при додаванні до них певних антибіотиків, солей, зміні рН.

Рідкі елективні середовища називають середовищами накопичення. Прикладом такого середовища служить пептонна вода з рН 8,0. При такому рН на ній активно розмножується холерний вібріон, а інші мікроорганізми не ростуть; г) диференційно-діагностичні середовища дозволяють відрізнити (диференціювати) один вид мікробів від іншого по ферментативної активності, наприклад середовища Гісса з вуглеводами і індикатором. При зростанні мікроорганізмів, що розщеплюють вуглеводи, змінюється колір середовища; д) консервуючі середовища призначені для первинного посіву та транспортування досліджуваного матеріалу; в них запобігається відмирання патогенних мікроорганізмів і пригнічується розвиток сапрофітів. Приклад такого середовища - гліцеринова суміш, використовувана для збору випорожнень при дослідженнях, що проводяться з метою виявлення ряду кишкових бактерій.
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна " Живильні середовища і мікробіологічне дослідження "
  1. Тема: бактеріологія, мікології, протозоологов
    Систематика і номенклатура мікроорганізмів. Об'єкти вивчення мікробіології. Прокаріоти (бактерії), їх відмінність від мікробів еукаріотів (найпростіші, гриби) за структурою, хімічним складом, функції. Сучасні підходи до систематики мікроорганізмів. Таксономічні категорії: царство, відділ, сімейство, рід, вид. Внутрішньовидові категорії: біовар, серовар, фаговар, морфовар, культивар.
  2. 3. ПИТАННЯ ДО ІСПИТУ
    Розділ 1. Загальна частина Морфологія мікроорганізмів 1. Основні принципи класифікації мікробів. 2. Морфологічні та тинкторіальні властивості бактерій. Методи забарвлення. 3. Структура та хімічний склад бактеріальної клітини. Особливості будови грампозитивних і грамнегативних бактерій. 4. Морфологія грибів. Принципи класифікації. 5. Морфологія найпростіших. Принципи
  3. ДІАГНОСТИКА ІНФЕКЦІЙНИХ ХВОРОБ
    Джеймс Дж. Плорд (James f. Plorde) Для діагностики інфекційної хвороби потрібно пряме або непряме виявлення патогенного мікроорганізму в тканинах ураженого макроорганізму. У цьому розділі описані основні методи, за допомогою яких це досягається. Пряме мікроскопічне дослідження. Пряме мікроскопічне дослідження тканинних рідин, ексудатів і тканин є одночасно
  4. внутрішньолікарняних інфекцій
    Пірс Гарднер, Пол М. Арно (Pierce Gardner, Paul M. Arnow) Визначення. Внутрішньолікарняні інфекції, звані також нозокоміальнимі, є важливою причиною захворюваності та смертності. Їх визначають як інфекції, які виникають у хворих після надходження в лікувальний заклад за умови, що в момент надходження у хворого не було клінічних проявів цих інфекцій, і він не
  5. анаеробної інфекції
    Денніс Л. Кеспер (Dennis L. Kasper) Визначення. Анаеробні бактерії - це мікроорганізми, для зростання яких потрібно низька напруга кисню і які не можуть рости на поверхні щільного живильного середовища в присутності 10% вуглекислоти. Мікроаерофільні бактерії можуть рости при вмісті її в атмосфері в кількості 10%, а також в анаеробних або аеробних умовах. Факультативні
  6. ІНФЕКЦІЇ, СПРИЧИНЕНІ легионелла
    Гаррі Н. Беті, А. Вільям Паскюлль (Harry N. Beaty, A. William Pasculle) Визначення. Це гострі респіраторні інфекції, що викликаються бактеріями, що відносяться до роду Legionella. Типовим представником роду є L. pneumophila. Пневмонія, що викликається цим мікроорганізмом, носить назву хвороби «легіонерів» і служить прототипом всіх інфекцій, викликаних представниками цієї групи. В
  7. Ведення післяопераційного періоду
    Досягнення сучасної анестезіології дозволяють забезпечити стабільний стан основних функцій організму протягом операції. Але після закінчення хірургічного втручання і виходу хворий зі стану наркозу організм породіллі потрапляє в умови, при яких захисні властивості загальної анестезії відсутні і починають діяти больові, токсичні та емоційні чинники. Тому для
  8. Передмова
    Мільйони років тому на Землі з'явилися патогенні мікроорганізми і лише на рубежі XIX-XX ст. був досягнутий вирішальний перелом у боротьбі з хворобами, що викликаються цими мікроорганізмами. Але на порозі 2002 перед медициною постали нові проблеми: погіршення епідеміологічної обстановки по багатьом інфекціям, швидке старіння населення, збільшення людей з імунодефіцитами, що сприяє широкому
© medbib.in.ua - Медична Бібліотека