Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
ГоловнаМедицинаІмунологія та алергологія
« Попередня Наступна »
Адельман Д.. Імунологія, 1993 - перейти до змісту підручника

Оцінка функціональної активності лімфоцитів

А. B-лімфоцити

1. Дослідження функцій B-лімфоцитів in vivo

а. Дослідження функцій B-лімфоцитів починають з визначення рівня імуноглобулінів в сироватці. Для цього найчастіше застосовують нефелометрії і просту радіальну іммунодіффузія. Результати дослідження оцінюють з урахуванням віку (див. додатки IV і V). Пол і расова приналежність майже не впливають на рівень імуноглобулінів в сироватці.

Б. Для поглибленої оцінки гуморального імунітету визначають рівень підкласів IgG. Хоча в більшості випадків зміна рівня підкласів IgG не супроводжується вираженими клінічними проявами, у хворих з рецидивуючими інфекціями відносний вміст підкласів IgG значно відрізняється від норми. При цьому загальний рівень IgG та інших імуноглобулінів може бути нормальним. Оскільки визначення підкласів IgG - дорогий метод, він застосовується в рідкісних випадках. Поряд з визначенням підкласів IgG при діагностиці імунодефіцитів оцінюють також гуморальний імунну відповідь на певні антигени (див. гл. 20, п. III.А.1.в).

В. Визначення антитіл до білкових і полісахаридних антигенів. Цей метод заснований на визначенні рівня антитіл до білкових (наприклад, правцевому і дифтерійному анатоксинів) і полісахаридних (наприклад, пневмококової вакцині) антигенів до і після вакцинації. Він застосовується лише в спеціалізованих лабораторіях. Порушення продукції антитіл до білкових і полісахаридних антигенів підтверджує недостатність гуморального імунітету і свідчить про необхідність призначення нормального імуноглобуліну для в / в введення (навіть при нормальному рівні імуноглобулінів сироватки). Визначення продукції антитіл до полісахаридних антигенів у дітей молодше 2 років малоинформативно і зазвичай не проводиться (див. гл. 18, пп. IV.А.2.а-б).

2. Дослідження функцій B-лімфоцитів in vitro. Це дослідження оцінює здатність B-лімфоцитів до диференціювання в плазматичні клітини і виробленні ними імуноглобулінів у відповідь на неспецифічний (мітоген) і специфічний (антиген) стимул в культурі клітин. Його зазвичай проводять тільки в наукових цілях.

Б. T-лімфоцити

1. Дослідження функцій T-лімфоцитів in vivo

а. Абсолютне число лімфоцитів. Оскільки в нормі T-лімфоцити складають близько 70% всіх лімфоцитів крові, істотне зниження числа T-лімфоцитів значно більше позначається на загальному числі лімфоцитів, ніж зниження B-або NK-лімфоцитів.

Б. Шкірні проби дозволяють оцінити здатність T-лімфоцитів викликати алергічну реакцію сповільненого типу при внутрішньошкірне введення антигена. Розміри еритеми і папули в місці ін'єкції визначають через 24 і 48 ч. Оскільки негативна реакція може бути наслідком не тільки порушення імунітету, але й відсутності попереднього контакту з даним антигеном, пробу проводять з набором широко поширених антигенів, до якого входять дерматофітін 0, тріхофітонамі, антиген вірусу епідемічного паротиту, очищений туберкулін, правцевий і дифтерійний анатоксини (див.
гл. 18, п. III.Ж). Негативна реакція на декілька поширених антигенів у хворих з опортуністичними інфекціями свідчить про вираженої недостатності клітинного імунітету. Важливу роль у діагностиці імунодефіцитів відіграють також дані анамнезу. Так, якщо минулого відзначався алергічний контактний дерматит (наприклад, викликаний ядоносних сумахом), недостатність клітинного імунітету малоймовірна.

2. Дослідження функцій T-лімфоцитів in vitro

а. Проліферативну активність T-лімфоцитів оцінюють за інтенсивністю синтезу ДНК у відповідь на стимуляцію мітогеном (поліклональна стимуляція) або антигеном (моно-і олігоклональних стимуляція). В останньому випадку застосовуються поширені антигени або аллоантігени. Інтенсивність синтезу ДНК оцінюють по включенню в неї мічених радіоактивним ізотопом нуклеозидів, наприклад 3H-тимідину. Результати зазвичай висловлюють в імпульсах за хвилину (імп / хв) і у вигляді індексу стимуляції - відношення радіоактивності стимульованих і нестимульований лімфоцитів. Мітогени стимулюють проліферацію значної частини T-лімфоцитів, тому результат оцінюють зазвичай через 3 сут. Антиген стимулює проліферацію тільки тих T-лімфоцитів, які несуть рецептор до нього, тому індуковану антигеном проліферацію оцінюють через 5-7 діб. Для оцінки проліферативної активності T-лімфоцитів, як і при проведенні шкірних проб, застосовують набір широко поширених антигенів. У ВІЛ-інфікованих пролиферативная реакція T-лімфоцитів на поширені антигени може бути знижена вже на ранніх стадіях захворювання. Прогресування ВІЛ-інфекції та інших імунодефіцитів супроводжується зниженням реакції T-лімфоцитів на аллоантігени, а згодом - і на мітогени. Відсутність реакції на мітогени свідчить про важку недостатності клітинного імунітету.

Б. Оцінка цитотоксичності. Зазвичай оцінюють цитотоксичність, обмежену за HLA, опосередковану лімфоцитами CD8 (див. гл. 17, п. II.А.1.а). Клітинами-мішенями служать власні клітини, що несуть на своїй поверхні чужорідний антиген, пов'язаний з антигенами HLA класу I. Лімфоцити CD8 відіграють важливу роль у захисті від вірусних інфекцій. Поряд з лімфоцитами CD8 обмежену за HLA цитотоксичность здійснюють деякі лімфоцити CD4, що розпізнають антиген в комплексі з антигенами HLA класу II. Обидві субпопуляції лімфоцитів несуть антігенраспознающіх рецептор, утворений альфа-і бета-ланцюгами. Лімфоцити CD8 з антігенраспознающіх рецептором, утвореним гамма-і дельта-ланцюгами, беруть участь у цитотоксичності, не обмеженої по HLA. Ці лімфоцити присутні в крові в незначній кількості і руйнують клітини-мішені подібно NK-лімфоцитам, тобто без попередньої імунізації (див. гл. 20, п. III.B). Оцінка клітинної цитотоксичності необхідна для діагностики імунодефіцитів. Оцінку цитотоксичної активності лімфоцитів проводять таким чином: 1) клітини-мішені обробляють радіоактивною міткою (51Cr), 2) до міченим клітин-мішеней додають досліджувані лімфоцити; 3) загибель клітин-мішеней оцінюють по виходу радіоактивності в розчин.
Отримані результати порівнюють з нормальними показниками. При дослідженні обмеженою по HLA цитотоксичності досліджувані T-лімфоцити попередньо інкубують з антигеном, присутнім на клітинах-мішенях.

В. Дослідження цитокінів. Активовані лімфоцити виробляють біологічно активні речовини - цитокіни (див. гл. 1, п. IV.Б). Їх рівень визначають за допомогою готових наборів для РИА і твердофазного ІФА. Існують і більш трудомісткі методи дослідження цитокінів, засновані на оцінці їх біологічних функцій. Оцінити вміст цитокінів in vivo досить складно, оскільки вони міцно пов'язані з клітинними рецепторами, а в сироватці та інших біологічних рідинах швидко руйнуються.

В. Дослідження функцій NK-лімфоцитів

1. Цитотоксичність NK-лімфоцитів не залежить від попередньої імунізації і не обмежена за HLA. Цитотоксичну активність NK-лімфоцитів оцінюють за допомогою методу, описаного в гол. 20, п. III.Б.2.б, використовуючи як клітин-мішеней різні лінії трансформованих клітин, чутливих до дії NK-лімфоцитів. Руйнування клітин-мішеней здійснюється лише при утворенні тісного контакту з NK-лімфоцитами. Цей контакт може бути прямим або опосередкованим, при якому NK-лімфоцити прикріплюються до покритим IgG клітин-мішеней через рецептор до Fc-фрагменту IgG - антитілозалежна клітинна цитотоксичність. Завдяки цьому механізму можуть бути зруйновані клітини-мішені, спочатку стійкі до дії NK-лімфоцитів. Антителозависимую клітинну цитотоксичність оцінюють за допомогою стандартного методу (див. гл. 20, п. III.Б.2.б), використовуючи клітини-мішені, вкриті антитілами класу IgG. NK-лімфоцити відіграють важливу роль у противірусний і протипухлинному імунітеті і беруть участь у відторгненні трансплантата. Зниження цитотоксичної активності NK-лімфоцитів виявляється при багатьох захворюваннях, у тому числі при злоякісних новоутвореннях, а відсутність спостерігається вкрай рідко.

2. Активація NK-лімфоцитів цитокінами. Після інкубації з певними цитокінами цитотоксическая активність NK-лімфоцитів значно підвищується. Так, при додаванні інтерферону гамма активність NK-лімфоцитів підвищується вже через кілька годин. Після інкубації з интерлейкином-2 протягом декількох діб NK-лімфоцити стають активними у відношенні будь-яких трансформованих клітин-мішеней, у тому числі пухлинних клітин. В даний час досліджується можливість застосування активованих цитокінами NK-лімфоцитів при деяких злоякісних новоутвореннях.
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна " Оцінка функціональної активності лімфоцитів "
  1. Виразкова хвороба шлунка та дванадцятипалої кишки
    З тих пір, як близько 200 років тому Крювелье привернув увагу лікарів до виразки шлунка, інтерес до цього захворюванню прогресивно зростає. Приблизно те ж відноситься до докладно описаної набагато пізніше (Moynihan, 1913) виразкової хвороби дванадцятипалої кишки. Під виразковою хворобою в даний час розуміють загальне, хронічне, рецидивуюче, циклічно протікає захворювання, при якому
  2. гнійно-запальних післяпологових захворювань
    Післяпологові інфекційні захворювання - захворювання, які спостерігаються у породіль, безпосередньо пов'язані з вагітністю та пологами і обумовлені бактеріальною інфекцією. Інфекційні захворювання, виявлені в післяпологовому періоді, але патогенетично не зв'язані з вагітністю та пологами (грип, дізентірея та ін), до групи післяпологових захворювань не відносять. ЕТІОЛОГІЯ І ПАТОГЕНЕЗ
  3. МЕДИЧНА ІМУНОЛОГІЯ
    Тема: Імунологія як наука про способи і механізми захисту від генетично чужорідних речовин з метою підтримання гомеостазу організму Виникнення і становлення імунології як науки, етапи формування імунології. Роль вітчизняних та зарубіжних вчених у розвитку імунології, нобелівські лауреати в галузі імунології. Основні напрямки сучасної імунології: клітинна, молекулярна,
  4. 68. Цироз печінки
    Цироз печінки - хронічна патологія печінки з поступової загибеллю гепатоцитів, поширеним фіброзом і вузликами-регенератами, поступово заміщають паренхіму; супроводжується недостатністю функцій гепатоцитів і зміною кровотоку печінки, що призводить до жовтяниці, портальної гіпертензії та асціту.Прічіни - Алкоголізм - Вірусний гепатит (В, С, D) - Успадковані хвороби - ЛЗ і токсини -
  5. Репродуктивні органи репродуктивної системи
    1.3.1. Анатомо-фізіологічна і гістофізіологіческая характеристика статевих органів жінки в репродуктивному періоді 1.3.1.1. Яєчники Яєчники статевозрілої жінки розташовані в малому тазу (рис. 1.6), кілька асиметрично на задньому листку широкої зв'язки. Положення яєчників в порожнині малого таза в цьому віці відносно непорушне. Зсув їх у черевну порожнину спостерігається
  6. Лейоміома матки
    Визначення поняття. Лейоміома матки (ЛМ) - одна з найбільш часто зустрічаються доброякісних пухлин репродуктивної системи жінки. Пухлина має мезенхімального походження і утворюється з мезенхіми статевого горбка, навколишнього зачатки Мюллерова проток (рис. 4.8). Мезенхіма є попередником примітивного міобласти, індиферентних клітин строми ендометрію і різних клітинних
  7. Генітальний ендометріоз
    Визначення поняття. Поняття ендометріоз включає наявність ендометріоподобние розростань, що розвиваються поза межами звичайної локалізації ендометрію - на вагінальної частини шийки матки, в товщі м'язового шару матки і на її поверхні, на яєчниках, тазовій очеревині, крижово-маткових зв'язках і т.п. У зв'язку з тим що анатомічно і морфологічно ці гетеротипії не завжди ідентичні слизової
  8. Пневмонії
    ПНЕВМОНІЯ (Пн) - гостре інфекційне ураження нижніх відділів дихальних шляхів, підтверджене рентгенологічно, домінуюче в картині хвороби і не пов'язане з іншими відомими причинами. У визначенні Пн підкреслюється гострий характер запалення, тому немає необхідності вживати термін «гостра пневмонія» (в Міжнародній класифікації хвороб, ухваленій Всесвітньою організацією
  9. Хронічна обструктивна хвороба легень
    хронічних обструктивних хвороба легень (ХОЗЛ) - первинно хронічне запальне захворювання легень з переважним ураженням дистальних відділів дихальних шляхів і паренхіми, формуванням емфіземи, порушенням бронхіальної прохідності з розвитком неповністю оборотної або незворотною бронхіальної обструкції, викликаної патологічної запальною реакцією. Хвороба розвивається у
  10. Бронхіальна астма
    бронхіальна астма (БА) - «хронічне захворювання, основою якого є запальний процес в дихальних шляхах за участю різноманітних клітинних елементів, включаючи гладкі клітини, еозинофіли і Т-лімфоцити. У схильних осіб цей процес призводить до розвитку генералізованої бронхіальної обструкції різного ступеня вираженості, повністю або частково оборотною спонтанно або під
© medbib.in.ua - Медична Бібліотека