Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
ГоловнаМедицинаВетеринарія
« Попередня Наступна »
. Санітарний кодекс наземних тварин, 2009 - перейти до змісту підручника

ВІДБІР І ЗВЕРНЕННЯ з яйцеклітиною, ембріон ЛАБОРАТОРНИХ ГРИЗУНІВ І КРОЛИКІВ

Стаття 4.10.1.



Вимоги до змісту колоній лабораторних тварин

Зміст колоній лабораторних тварин особливих генотипів вимагає строгого проходження методам вирощування в спеціально призначених для цієї мети приміщеннях. Тварини можуть міститися в гнотобіонтной середовищі, яке є або вільною від патогенних збудників системою, або закритим віварієм (зазвичай з певною флорою), у звичайній колонії або в невизначених умовах. У вільній від патогенних збудників системі вирощування і закритому віварії тварини утримуються в контрольованому середовищі завдяки процедурам, що перешкоджає проникненню потенційних джерел мікробного зараження. Головним розходженням між цими двома системами є те, що містяться в закритому стані тварини інокулював відомими (визначеними *) мікроорганізмами, в той час як гнотобіонтние жовтня захищені як від патогенних, так і від непатогенних мікроорганізмів.

Лабораторні тварини можуть також міститися в звичайних закритих колоніях, в яких можуть бути присутніми відомі патогенні збудники. Застосовувані в цьому випадку процедури контролю потенційних джерел зараження менш суворі, але вже дотримання елементарних правил асептики (таким, як автоклавирование корму і підстилки) дозволить підтримання тварин у певному мікробному оточенні. Лабораторні тварини можуть також перебувати в середовищах, мікробний статус яких не визначено (неізольовані колонії, тварини, вирощувані на волі).

Таким чином, можна вважати, що виявлення хвороб і обов'язкові вимоги, пропоновані до маніпуляціями з самками-донорами і ембріонами, визначаються залежно від одного з трьох типів колоній: колонії з певною флорою, звичайні колонії і колонії з невизначеним статусом. Раз на три місяці санітарний стан колоній повинно піддаватися контролю з проведенням бактеріологічних, вірусологічних, паразитологічних, серологічних та імуногістохімічних тестів, здійснюваних на попередньо відібраних особинах або інших репрезентативних тварин колонії (наприклад, на дорослих самцях-виробниках, від яких було отримано кілька приплодів).



Стаття 4.10.2.



Вимоги до бригади лабораторії з відбору ембріонів

1. Бригада з виробництва ембріонів повинна складатися з кваліфікованих техніків, що працюють під управлінням досвідченого ембріолога, що володіє університетським дипломом (наприклад, ветеринарний лікар або кандидат ветеринарних наук).

2. Персонал бригади повинен бути навчений принципам профілактики хвороб і використанню різних методів асептики при маніпуляції з ембріонами. Санітарні процедури лабораторії повинні відповідати Керівництву IETS **.

3. Бригада з виробництва ембріонів повинна дотримуватися всі необхідні обережності по захисту установок з вирощування та лабораторного обладнання та інструментарію від мікробного зараження. Здатність ряду патогенних збудників викликати зоонози повинна бути чітко доведена до відома всіх членів персоналу з метою недопущення зараження колоній через людину (і навпаки). Повинні бути вжиті заходи щодо недопущення вільного допуску в ембріональну лабораторію персоналу з інших приміщень.

4. Відповідальний ембріолог зобов'язаний систематично вести журнали і бути в змозі в будь-який момент представити їх для інспекції.

Оскільки стандартні картки для лабораторних тварин ще не розроблені, кожна лабораторія повинна вести детальну документацію на всіх тварин і ембріони (збір ембріонів, відомості щодо заморожування). При необхідності до них слід додавати відомості того типу, що включені в стандартні картки IETS ** для сільськогосподарських тварин. У документації повинні бути також чітко вказані дані за системою оцінки якості ембріонів, стадії морфологічного розвитку до моменту заморожування і генотипом самок-донорів.

5. Відповідальний ембріолог (керівний лабораторією) зобов'язаний стежити, щоб ембріони зберігалися в належному стані в стерильних і опечатаних контейнерах (наприклад, ампулах або піпетках). Ці контейнери повинні бути забезпечені етикеткою стандартної форми із зазначенням виду / генотипу ембріона, дати кріоконсервації, кількості ембріонів і стадії їх розвитку, номера реципієнта, а також усіх проведених операцій (наприклад, запліднення in vitro або микрооперация), так само як і інших приватних характеристик ( ембріони гнотобіотіческіе або з певним мікробним статусом).



Стаття 4.10.3.



Вимоги до ветеринарного лікаря бригади або лабораторії з відбору ембріонів

1.
Ветеринарний лікар - фахівець з лабораторним тваринам або призначений для роботи з ними, повинен стежити, щоб ветеринарні правила, що відносяться до колоній, дійсно дотримувалися, а результати їх дії перевірялися і письмово реєструвалися до відправки ембріонів. У його обов'язки також входить перевірка дотримання належних умов вирощування та гігієни.

2. В обов'язки ветеринарного лікаря входить посвідчення, що процедури маніпуляції ембріонами ведуться і умови лабораторної роботи дотримуються відповідно до Керівництва IETS **.

3. На нього покладено також перевірка всіх карантинних заходів, що проводяться з метою недопущення зараження і поширення хвороб, і оцінка їх результатів.

4. Ветеринарний лікар відповідає за видачу дозволів на відправлення ембріонів, при цьому він повинен стежити, щоб ветеринарно-сертифікаційні документи та форми по відбору ембріонів були належним чином заповнені і додавалися до відправлені партіям.



Стаття 4.10.4.



Дослідження самок-донорів

У кожній колонії донорів чутливі тварини повинні подвергатьсяежемесячному мікробіологічному тесту. Дослідження на присутність окремих патогенних збудників залежить з одного боку - від виду тварин і, з іншого боку - від географічного розташування. Рекомендації щодо підлягають дослідженню мікроорганізмів, характерних для мишей, щурів, ворсистих щурів (cotton rats), хом'яків, морських свинок, гербілей і кроликів, опубліковані ***.



Стаття 4.10.5.



Вимоги до поводження з ембріонами / тваринами

1. Певні мікробіологічні умови

а) Гнотобіотіческіе тварини і тварини з певним мікробним статусом - оскільки вони містяться в закритому віварії, являють собою більш "чистий" джерело гамет, а ембріони з них отримані можуть вважатися вільними від патогенних збудників .

Б) Виходячи з того, що самі тварини є вільними від патогенних збудників або є носіями певної флори (зазвичай відомою завдяки щомісячним вибірковим тестам на чутливих тварин), розсічення репродуктивних органів та ізоляція ембріонів можуть проводитися в асептичних умовах, без звернення до біокамере.

В) При цьому, однак слід дотримуватися суворої асептики, і хоча промивка ембріонів не є основним способом уникнення можливого зараження через повітря лабораторії, все ж рекомендується піддавати ембріони триразової промиванні. При кожній промивці ембріони обережно миються в середовищі, обсяг якої повинен мінімум в сто разів перевищувати обсяг, в який ембріони будуть поміщатися.

Г) Мікробіологічний контроль середовища ополіскування і промивання не обов'язковий.

Д) У документах повинно бути вказано, що ембріони, які зберігаються в холоді, походять з гнотобіотіческій колонії або з колонії з певною мікробіологічної флорою, що міститься в закритому віварії, що доводить відсутність необхідності прийняття додаткових заходів для видалення патогенних збудників. Повинна проводитися ізоляція запліднюють самок і спостереження їх ветеринарного стану, а рішення про карантинування приймається самою імпортує лабораторією.

2. Звичайні умови

а) Тварини, вирощувані в таких умовах, звичайно являють собою закриті колонії, ветеринарне стан яких регулярно визначається. Вони можуть піддаватися впливу різних патогенних збудників, що підтверджується або виділенням патогенних збудників, або виявленням антитіл, або ж проявом клінічних ознак. До початку відбору ембріонів слід точно знати, який патогенний збудник або збудники присутні в колонії.

Б) Репродуктивні органи (матка, яйцепроводи і / або яєчники) вилучають в окремому місці, після чого вони надходять в лабораторію з відбору ембріонів. Ця операція повинна здійснюватися техніками, які не є працівниками лабораторії, а в тому випадку, коли це неможливо - треба, як мінімум, міняти захисний одяг при переході з одного місця в інше. Якщо ж тварини повинні оперуватися в самій лабораторії, репродуктивні органи повинні вилучатись в ізольованій біокамере в цілях недопущення поширення патогенних збудників по лабораторії.

В) Відбір ембріонів з репродуктивного органу ведуть в асептичних умовах. Ембріони повинні бути обстежені при збільшенні> 100 х на наявність пошкоджень пеллюцідной зони. Зберігатися повинні виключно ембріони з неушкодженою пеллюцідной зоною. Після дослідження вони повинні промиватися за класичною десятіетапной методикою, описаної в Посібнику IETS **.
Цією рекомендації можна не дотримуватися, якщо за результатами достатньої кількості обстежень буде доведено наявність контакту між ембріонами і патогенними збудниками.

Г) Ембріони, що походять від тварин, що мають антитіла проти певних патогенних збудників, або демонструють інші ознаки зараження такими збудниками, можуть переміщатися в нові колонії лише за умови проходження карантину і при використанні запліднюють самок з відомим мікробним статусом. В якості додаткової запобіжної міри запліднює реципієнти повинні карантініроваться при виникненні сумніву щодо ветеринарного благополуччя самок-донорів або ембріонів. У ряді ситуацій, коли ембріони могли зазнати впливу бактеріальної інфекції (микоплазменной, наприклад), їх поміщають на 24 години в середу, що містить антибіотики - або до заморожування, або між розморожуванням і пересадкою.

Д) У випадку, коли ембріони не обробляються відповідно до рекомендацій, про це має бути зазначено в супровідних документах. Самки-реципієнти і новонароджені повинні в такому випадку в обов'язковому порядку поміщатися в карантин лабораторією-одержувачем до надходження підтвердження їх ветеринарного благополуччя. Потомство самки-реципієнта після відлучення може поміщатися в колонію тільки після задовільних результатів дослідження самки-реципієнта на наявність патогенної мікрофлори.

3. Невизначені мікробіологічні умови

а) Такі тварини відбуваються або з дикої фауни, або з колоній, ветеринарний статус яких невідомий. Отримані від них ембріони вимагають прийняття максимальних заходів обережності. Ветеринарне стан самців-виробників і самок-донорів має контролюватися спочатку за 15 днів до спарювання, а потім в день злучки - для самців і при відборі ембріонів - у самок. Допускається також приміщення цих тварин у звичайну колонію, в якій буде можливо в подальшому прояснити їх минулий ветеринарний статус з метою пом'якшення вимог зі спостереження за ними і за відбором ембріонів.

Б) Будь-які маніпуляції з тваринами, тканинами і ембріонами повинні проводитися в біокамере.

В) аліквотна частина рідини промивки від кожної самки-донора або змішана проба повинні піддатися дослідженню на наявність патогенних збудників, які становлять небезпеку для країни-імпортера або лабораторії.

Г) Ембріони повинні промиватися у відповідності з процедурою, описаною в Керівництві IETS ** (десятиразова промивка, а в разі, коли потрібно знищення низки герпесвирусов - з обробкою трипсином). Аліквотна частина від останніх чотирьох рідин промивки (змішаних) повинна піддаватися контролю з метою можливого виявлення патогенних збудників.

Д) Заморожені ембріони повинні зберігатися експортує лабораторією до закінчення тестування тканин і рідин. Всі ембріони, що відбуваються від цих тварин, повинні бути поміщені в колонію на карантин, як то описано вище. Крім цього, перевірці повинні піддаватися не тільки самки-реципієнти, але і їх потомство у віці 12 тижнів і / або тварини наступних поколінь, - які повинні піддаватися контролю перед приміщенням їх в репродуктивні колонії, розташовані поза місцем карантину.



Стаття 4.10.6.



Особливі експериментальні обставини

У тому випадку, коли ембріони повинні бути заморожені після спеціальних мікроманіпуляцій з вторгненням в пеллюцідную зону, - до початку обробки їх слід піддавати необхідним промивка (в Залежно від характеристик колонії). При заплідненні in vitro з метою максимального зниження можливості проникнення патогенних збудників рекомендується також використовувати виключно промиту сперму. Перед заморожуванням ембріони повинні бути знову промиті.

* Recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guineapig and rabbit breeding colonies. - Report of the Federation of European Laboratory Animal Science Associations (FELASA), Working Group on Animal Health accepted by the FELASA Board of Management, November (1992).

  ** Керівництво Міжнародного товариства перенесення ембріонів, 1998 г.

  *** Schiewe, MC; Hollifield, VM; Kasbohm, LA; Schmidt, PM (1995) - Embryo importation and cryobanking strategies for laboratory animals and wildlife species. - Theriogenology, 43, 97-104. 
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
 Інформація, релевантна "ВІДБІР І ЗВЕРНЕННЯ з яйцеклітиною, Ембріон ЛАБОРАТОРНИХ ГРИЗУНІВ І КРОЛИКІВ "
  1. К
      + + + Каверна (від лат. Caverna - печера, порожнина), порожнина, що утворюється в органах після видалення некротичної маси. К. виникають (наприклад, при туберкульозі) в легенях. К. можуть бути закритими і відкритими при повідомленні їх з природним каналом. Див також Некроз. + + + Кавіози (Khawioses), гельмінтози прісноводних риб, що викликаються цестодами роду Khawia сімейства Garyophyllaeidae,
  2. П
      + + + Падевий токсикоз бджіл незаразна хвороба, що виникає при харчуванні бджіл (падевим медом і супроводжується загибеллю дорослих бджіл, личинок, а в зимовий час і бджолиних сімей. Токсичність падевого меду залежить від наявності в ньому неперетравних вуглеводів, алкалоїдів, глікозидів, сапонінів, дубильних речовин, мінеральних солей і токсинів, що виділяються бактеріями і грибами. Потрапляючи в середню
  3. С
      + + + Сабур (тур. sabur), висушений сік листя рослини алое (Aloe arborescens) сімейства лілійних; проносний засіб. Темно-бурі шматки або порошок. Добре розчинний у гарячій воді, спирті, розчинах лугів. Діючі початку - антрагликозиди (алоин). У малих дозах діє як гіркота, покращуючи апетит і посилюючи травлення, желчегонно. Місцево чинить слабку подразнюючу,
  4. Т
      + + + Таблетки (Tabulettae), тверді дозовані Лікарське форми, одержувані пресуванням. Мають вигляд круглих, овальних чи іншої форми пластинок або дисків. До складу Т. входять Лікарське та допоміжні речовини. В якості останніх (їх кількість не повинна перевищувати 20% від маси ліків, речовин) застосовують цукор, крохмаль, глюкозу, гідрокарбонат натрію, хлорид натрію, каолін, тальк і
  5. А
      список А, група отруйних високо токсичних лікарських засобів, що передбачається Державною фармакопеєю СРСР; доповнюється і змінюється наказами Міністерства охорони здоров'я СРСР. При поводженні з цими лікарськими засобами необхідно дотримуватися особливої ??обережності. Медикаменти списку зберігаються в аптеках під замком в окремих шафах з написом «А - venena» (отруйні). Перед закриттям
  6. Б
      + + + Б список сильнодіючих лікарських засобів; група лікарських засобів, при призначенні, застосуванні і зберіганні яких слід дотримуватися обережності. До списку Б належать ліки, що містять алкалоїди та їх солі, снодійні, анестезуючі, жарознижуючі та серцеві засоби, сульфаніламіди, препарати статевих гормонів, лікарську сировину галенових і новогаленові препарати і
  7. О
      + + + Обволікаючі засоби, см. Слизові кошти. + + + Знешкодження м'яса, см. Умовно придатне м'ясо. + + + Знезараження води, звільнення води від мікроорганізмів, патогенних для тварин і людини. Методи О. в.: Хлорування, кип'ятіння, озонування, знезараження ультрафіолетовими променями, ультразвуком, струмами високої частоти і ін Найчастіше застосовують хлорування води, використовуючи
  8. Р
      + + + Рабдовіруси (Rhabdoviridae), пестівіруси, сімейства вірусів, що містять однонитчатим несегментірованной РНК лінійної форми; молекулярна маса 3,5-4,6 X 106 дальтон. Віріони пулевідной форми, їх діаметр близько 70 нм, довжиною від 140 до 230 нм, мають мембраноподобная оболонкою, формуються в цитоплазмі брунькуванням з клітинних мембран. Вірус чутливий до дії жірорастворітелей,
  9.  ВІДБІР І ЗВЕРНЕННЯ з ембріонами ХУДОБИ І непарнокопитних, відібравши IN VIVO
      Стаття 4.7.1. Цілі контролю Метою офіційного санітарного контролю ембріонів, відібраних in vivo, які призначені для міжнародної торгівлі, є гарантія відсутності в них патогенних організмів та недопущення зараження прийомних самок і їх потомства. Стаття 4.7.2. Вимоги, що пред'являються до бригади з відбору ембріонів Бригада з відбору ембріонів - це
  10. Г
      + + + Габітус (лат. habitus - зовнішність, зовнішність), зовнішній вигляд тварини в момент дослідження. Визначається сукупністю зовнішніх ознак, що характеризують статура, вгодованість, положення тіла, темперамент і конституцію. Розрізняють статура (будова кістяка і ступінь розвитку мускулатури): сильне, середнє, слабке. Вгодованість може бути гарною, задовільною,
© medbib.in.ua - Медична Бібліотека