загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові , генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня Наступна »

Механізм противірусної ДІЇ фоспренила: ПРИНЦИПИ ПРОФІЛАКТИКИ ТА ЛІКУВАННЯ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ

Ожерелков С.В.



Початком препарату фоспренил, який володіє широким спектром біологічної активності (гепатопротекторною, ранозагоювальної, антидіабетичної та ін), є фосфати полипренолов (ФП). Однією з найбільш привабливих та актуальних для практичної ветеринарії (і медицини) сторін є противірусна активність фоспренила. Іншим перспективним для лікувальної практики напрямком є ??імуномодулююча активність фоспренила, застосування ФП в якості ад'юванта для противірусних вакцин. Механізми противірусної дії фоспренила остаточно не вивчені. Це пояснюється поліфункціональної активністю і комплексною дією фоспренила при вірусній інфекції, як на організм у цілому (включаючи клітини імунної системи), так і на клітинному рівні, включаючи: 1) клітини імунної системи, 2) клітини-мішені для вірусів. У справжньому розділі ми хотіли б звернути увагу фахівців на доцільність використання фоспренила як профілактичний і лікувальний противірусного засобу, і узагальнити наявні дані, що стосуються механізмів його дії як імуномодулятора, так і препарату, що володіє, мабуть, прямим противірусною ефектом.



ДІЯ фоспренила ЯК імунокоректором вторинних імунодефіцитів

До числа провідних факторів, що викликають в організмі тварин вторинний імунодефіцит (неможливість або зниження здатності імунної системи адекватно відповідати на інфікування організму патогенами різної природи , в тому числі і вірусами або, наприклад, сформувати вакцинальний імунітет), відноситься стрес. Відомо, що при сучасного життя, тварини постійно піддаються впливу безлічі стрес-факторів (стресорів), як фізичних (кліматичні умови, зміни екологічної обстановки, забруднення навколишнього середовища, антигенна навантаження, склад води і їжі, транспортування, тренувальні навантаження, травми та ін ), так і психогенних (зміна або втрата господаря, скупченість при утриманні на обмеженій площі та ін.)

У численних клінічних та експериментальних дослідженнях, починаючи з 60-х років і закінчуючи сучасними було показано, що стрес викликає в організмі людини і тварин імуносупресію: 1) знижує кількість циркулюючих Т-і В-лімфоцитів, антигенпрезентирующих клітин, імуноглобулінів, 2) пригнічує первинний і вторинний імунну відповідь до різних антигенів; значно знижує абсолютне число і фагоцитуючих активність макрофагів селезінки; 3) знижує цитотоксичну активність природних кілерів і макрофагів; 4) пригнічує здатність клітин продукувати a-, b-і g -інтерферон і, навпаки, сприяє збільшенню продукції деяких цитокінів (ІЛ-1b, ФНП-a). На тлі стрес-індукованого імунодефіциту в організмі тварин спостерігаються виникнення і обтяження перебігу цілого ряду вірусних інфекцій, активація латентних вірусних інфекцій, а також придушення розвитку специфічної імунної відповіді при вакцинації. При цьому сама по собі перенесена або латентна вірусна інфекція є чинником, що викликає формування імунодефіцитних станів, на тлі яких можуть розвиватися ускладнення у вигляді секундарних і опортуністичних інфекцій, ослаблена реакція на вакцинацію. Вторинний імунодефіцит можуть викликати багато вірусів, в т.ч. віруси, що грають важливу роль в інфекційній патології тварин (парвовіруси, герпесвіруси, ретровіруси, реовіруси та ін)

Дія перерахованих вище факторів пояснює знижену опірність тварин до вірусних інфекцій і зниження ефективності вакцинації. Все це обгрунтовує доцільність розробки і впровадження високоефективних иммунокорректоров. Незважаючи на те, що в сучасній клінічної та експериментальної практиці широко використовуються десятки природних і синтетичних імуномодуляторів (Олексин, ридостин, іммунофан, полиоксидоний, неовир, лейкінферон, циклоферон, ронколейкін - рекомбінантний ІЛ-2, беталейкін - рекомбінантний ІЛ-1b, глікопін, ВІЛОНА , тимоген. та ін), їх застосування обмежується низкою факторів, і лише вкрай небагато з них мають прямим противірусною ефектом.

В експериментах, проведених А.В.Саніним і співавторами, переконливо показано, що фоспренил, зареєстрований в РФ як противірусний препарат (А.В.Санін та ін, 1991), є ефективним імунокоректором вторинних імунодефіцитів, індукованих різними зовнішніми факторами: вірусною інфекцією, стресом, радіацією. Згідно з даними Л.Л.Данілова і співавт. (1999), одноразове внутрішньом'язове введення фоспренила мишам в дозі 5 мкг за короткий термін повністю відновлює спеціалізовані функції антітелообразующіх В-клітин (АОК), значно знижені внаслідок вірус-або стрес-індукованого імунодефіциту.

В експериментах на мишах, що піддавалися радіаційному впливу в дозі 900 радий, виявлено ефективність застосування фоспренила в якості коректора функцій стовбурових клітин кісткового мозку (СККМ). У опромінених контрольних тварин відзначали повне придушення проліферації СККМ, тоді як у опромінених мишей, яким одноразово перорально або внутрішньом'язово вводили ФП у дозі 0,4 мкг реєстрували значне збільшення здатності СККМ до проліферації.

Виходячи з накопичених фактів, можна припустити, що механізм иммунокорригирующей здатності фоспренила, мабуть, полягає в наступному. Ендогенні фосфати полипренолов беруть участь в біосинтезі N-гліканових ланцюгів глікопротеїнів, до яких належать, зокрема, всі види імуноглобулінів (IgA, IgG, IgM), g-і b-інтерферони, поверхневі антигени і практично всі рецептори клітинної поверхні. Цілком імовірно, що при вторинних імунодефіцитах в клітинах спостерігається недолік ендогенних фосфатів полипренолов, тому введення в організм додаткових ФП нормалізує фізіологію і функції імунокомпетентних клітин, в тому числі АОК. Одним з можливих механізмів усунення за допомогою фоспренила клітинного дисбалансу, спостережуваного при вторинному імунодефіциті, мабуть, є викид в кров СККМ при ін'єкціях тваринам фоспренила. З іншого боку, відомо, що ФП є інтегральним компонентами клітинних мембран і впливають на багато їх властивості (плинність, проникність і т.д.). Логічно припустити, що введення в організм екзогенних ФП сприяє відновленню як структур клітин (порушених внаслідок цитотоксичної дії гормонів стресу і глюкокортикоїдів або при інших несприятливих впливах, наприклад, при вірусних інфекціях), так і їх здатності до проліферації.

Таким чином, фоспренил може бути використаний у ветеринарній практиці як високоефективного антистрессорного препарату і іммунокорректора. Важливо відзначити, що фоспренил має цілий ряд переваг в порівнянні з іншими препаратами: 1) не є ксенобіотиком; 2) не є антигеном; 3) діє на організм комплексно: чи не стимулюючи вибірково-яке одне з ланок гуморального або клітинного імунітету, а сприяє нормальному функціонуванню клітин імунної системи організму в цілому; 4) фоспренил може використовуватися як неспецифічного профілактичного противірусного засобу і при цьому, на відміну від специфічних сироваток і імуноглобулінів, не має обмежень у часі застосування. Тут доречно підкреслити, що використання сироваток і імуноглобулінів високоефективно лише на ранніх стадіях інфекційного вірусного процесу. Сироватки ефективно працюють проти вірусу тоді, коли вірус знаходиться в крові. Це триває приблизно 5-7 днів після початку захворювання. Коли вірус "йде" в тканини, ефективність застосування сироваток різко падає. На пізніх термінах застосування таких препаратів може викликати розвиток ряду імунопатологічних реакцій і ускладнити перебіг інфекції. Наприклад, при експериментальному кліщовий енцефаліт було встановлено, що антитіла (у певних титрах) можуть індукувати шкідливу дію макрофагів у другій половині інкубаційного періоду.

Фоспренил, крім того, зарекомендував себе як високоефективний ад'ювант. Наприклад, в дослідах з інактивованої комерційної вакциною проти кліщового енцефаліту автором було показано, що вакцина, безпосередньо розлучена не звичайним розчинником, а фоспренілом, збільшує свою специфічну активність в 8-10 разів. Використання фоспренила як ад'юванта противірусних вакцин значно підвищить ефективність вакцинації, особливо в тих випадках, коли у тварини виявлено або підозрюється вторинний імунодефіцит.



ФОСПРЕНІЛ - неспецифічні імуномодулятори не ВІРУСНИЙ ІНФЕКЦІЯХ

В експериментальних дослідженнях, проведених А.В.Саніним, А.Н.Наровлянскім, О.Ю.Сосновской, А. В.Проніним, А.В.Деевой та ін в дослідах in vivo і in vitro вдалося переконливо довести, що фоспренил володіє широким спектром біологічної активності, зокрема впливає на функціонування імунної системи, гемопоетичних і системи природної резистентності (AVSanin, ea, 1992, AVSanin, ea, 1993; LLDanilov ea, 1997). Одним з механізмів стимуляції фоспренілом системи природної резистентності організму є індукція вироблення ендогенних інтерферонів (ІФН). Наприклад, в дослідах на мишах лінії СВА показано, що при внутрибрюшинном одноразовому введенні фоспренила в дозах 40 і 200 мкг / миша реєструвалася індукція ІФН в сироватці крові через 2 години, причому рівень ІФН зберігався підвищеним до 72 годин після введення препарату, досягаючи 256 ОД, в той час як у контрольних тварин - 0 ОД. У дослідах in vitro було досліджено вплив ФП на дію стандартних індукторів ІФН: рідостін, Примавіру - Камедони (індукторів ІФН-a і ІФН-b), стафіллококкового ентеротоксину А (СЕА), визначає способи клітин до синтезу ІФН-g. Експерименти на мишах показали, що попереднє введення фоспренила в дозі 5 мкг / миша призводить до посилення активності застосовуваних згодом рідостін і Примавіру. У дослідах на клітинах мишачих фібробластів L929 було встановлено, що фоспренил збільшує неовир-і ридостин-індуковану продукцію ІФН-a / b. Крім того, показано, що фоспренил модулює активність іммукомпетентних клітин тимуса, селезінки, стимулюючи ІФН-відповідь на стандартні індуктори ІФН і сприяючи підвищенню ІФН-активирующей здатності сироватки і плазми крові.

Показано, що фоспренил здатний стимулювати в організмі тварин продукцію деяких цитокінів, що грають ключову роль у розвитку гуморального і клітинного імунної відповіді при вірусній інфекції. Так, на мишах лінії С57Вl / 6 встановлено, що фоспренил, введений тваринам одноразово в дозах 1 або 4 мкг, внутрішньом'язово або перорально, індукує продукцію ФНП до рівня 30-50 ОД. При внутрішньом'язовому введенні фоспренила мишам лінії BALB / c відзначали 3-6-кратну стимуляцію ІЛ-1 через 24 години. Пероральне введення препарату тваринам призводило до стимуляції ІЛ-1 в 1,6 рази в порівнянні з контролем через 7 діб. Всі ці дані були отримані на незаражених вірусами тварин. Виникає питання: як реалізується механізм противірусної дії фоспренила в організмі інфікованої вірусом тварини? Для відповіді на це питання ми провели серію дослідів, моделюючи у мишей інфекцію, викликану вірусом кліщового енцефаліту. Нам вдалося встановити, що при одночасному введенні в організм тварин вірусу і препарату, виживає до 60% мишей, тоді як заражені вірусом не оброблені фоспренілом миші хворіють і гинуть в 100% випадків через 7-9 доби після зараження вірусом. Ми провели обстеження сироваток крові тварин, яким вводили фоспренил і вірус, а також заражених мишей, яким фоспренил не запроваджували. За допомогою імуноферментного методу визначали рівні цитокінів ІЛ-6, ФНП-a, ІФН-g і ІЛ-2 на 1-е, 2-е, 3-и, 4-е, 5-е, 6-е і 7-е добу після зараження, тобто протягом всього інкубаційного періоду до початку прояву клінічних ознак кліщового енцефаліту (парезів і паралічів з подальшою загибеллю). У ті ж терміни визначали рівні цитокінів у мишей, яким вводили тільки препарат без вірусу. Результати дослідження показали, що в сироватках крові тварин, яким вводили вірус і фоспренил, рівень ІЛ-6 значно підвищувався вже на 1-у добу, а стимуляція ФНП-a, ІФН-g реєструвалася на 3-ю добу. Таку ранню стимуляцію не спостерігали ні у тварин, яким вводили тільки препарат, ні у мишей, яких заражали вірусом. Отримані дані, на наш погляд, свідчать про те, що при попаданні в організм патогена (в даному випадку вірусу) фоспренил стимулює моноцити і макрофаги, які продукують цитокіни, що стимулюють диференціювання (ІЛ-6) і проліферацію (ФНП-a), В- клітин і секрецію антитіл до вірусу. Крім того ФНП-a володіє цитотоксичність по відношенню до інфікованих вірусами клітинам. Аналогічної здатність має і ІФН-g.Так в загальних рисах виглядає механізм антивірусної активності фоспренила, що реалізується за допомогою його иммуномодулирующей активності.

Отримані нами дані на моделі інфекції, спричиненої вірусом кліщового енцефаліту, узгоджуються з результатами Iida J. et.al. (1990), які показали, що хімічно синтезований полипренолов - дегідрогептапренол (ДГП) у дозі 200 мкг, введений интраназально двічі - за 3 дні і за 1 день до зараження, значно підвищує стійкість мишей до інфекції, спричиненої вірусом Сендай. При цьому у тварин, оброблених ДГП і заражених вірусом, відзначали значне підвищення продукції інтерферону і ФНП в порівнянні з мишами, яким вводили тільки препарат або тільки вірус.

  Таким чином, фоспренил проявляє себе як один з оптимальних для ветеринарної практики імуномодуляторів: введений в організм при відсутності патогена (наприклад, вірусу), цей препарат, мабуть, не викликає гіперстимуляції імунної системи, яка, як відомо, може призводити до розвитку цілого ряду патологічних реакцій і зашкодити організму.
трусы женские хлопок
 У разі загрози розвитку вірусної інфекції застосування фоспренил викликає оптимальну "ранню" стимуляцію гуморального і клітинного імунітету, що і дозволяє організму вчасно захиститися від інфекції. Крім того, препарат в силу своєї хімічної природи має здатність відновити структуру і функції клітин імунної системи (і не тільки клітин імунної системи), пошкоджених внаслідок вірусної інфекції. Добре відомо, що багато вірусів активно розмножуються в імунокомпетентних клітинах і можуть довго зберігатися в них (персистувати). Деякі вірусні гени, маючи схожість з генами господаря, полегшують реплікацію вірусу. Наприклад, великі ДНК-віруси (герпесвіруси, аденовіруси, поксвирусов) мають у своєму геномі цілий ряд генів, які кодують білки, використовувані вірусами для протидії імунним реакціям організму (ці гени були, мабуть, захоплені вірусами в процесі еволюції і модифіковані в користь вірусів). Багато віруси мають здатність нейтралізовувати активність ряду цитокінів, що грають ключову роль у розвитку противірусної імунної відповіді (ІФН, ФНП, ІЛ-1, ІЛ-6, ІЛ-2, ІЛ-4), і тим самим - викликати в організмі імуносупресію. Використання фоспренила в профілактичних і лікувальних цілях при вірусних інфекціях дозволяє, на наш погляд, запобігати розвитку Вірусіндуцірованная імуносупресії.

  Слід особливо підкреслити, що успішне застосування ФП (як і інших імуномодуляторів) залежить від цілого ряду важливих обставин. По-перше, від особливостей патогенезу тієї чи іншої вірусної інфекції. Роль клітинного та гуморального імунітету, специфічні форми взаємодії вірусу з клітинами імунної системи (як і з основними клітинами-мішенями для вірусу) при багатьох вірусних інфекціях залишаються невивченими. По-друге, механізми імуномодулюючої дії фоспренила (враховуючи широкий спектр біологічної активності препарату) також знаходяться в процесі вивчення.

  Але навіть у тих випадках, коли патогенез вірусних інфекцій вивчений досить детально (наприклад, динаміка розмноження вірусу в клітинах-мішенях, особливості імунної відповіді, динаміка появи противірусних антитіл, зокрема - IgM, IgG, IgA - у крові хворих тварин) і, здавалося б, можна сміливо рекомендувати застосування тих чи інших імуномодуляторів залежно від спрямованості їх дії на імунну систему організму-господаря, тим не менш, застосовувати їх необхідно з певною обережністю. У цьому випадку фоспренил не є винятком із правила.

  Фоспренил виразно відноситься до комплексних иммуномодуляторам, тому слід було б очікувати найбільшого успіху при лікуванні з його допомогою парвовірусного ентериту собак або панлейкопении кішок (також викликається парвовирусом). І, в свою чергу - значно меншого ефекту при лікуванні чуми м'ясоїдних. Однак широка практика застосування фоспренила в якості засобу етіотропної терапії вірусних інфекцій собак і кішок показала, що найкращий результат лікування досягається саме при чумі м'ясоїдних у собак.

  Чому це відбувається? Насамперед, це можна пояснити особливостями патогенезу кожної вірусної інфекції. Так, парвовірусний ентерит характеризується швидким перебігом інфекції: максимальні титри вірусу в крові і фекаліях виявляються вже на 3-4-у добу після інфікування, а противірусні антитіла - лише на 5-7-у добу. При цьому задовго до того, як встигає сформуватися адекватна імунна відповідь, у хворої тварини виявляються ураженими вірусом життєво важливі органи: широко уражаються вже на 2-й день після експериментального зараження лімфовузли, тимус, селезінка, тонкий відділ кишечника. Тому лікувальний імуномодулюючий ефект фоспренила (як і багатьох інших препаратів, за винятком специфічних сироваток) може просто не встигнути вчасно реалізуватися. Інша картина спостерігається при інфікуванні організму вірусом чуми м'ясоїдних. Розвиток специфічної імунної відповіді реєструється вже на 3-5-у добу, при цьому стимулюється Т-і В-система імунітету. Перебіг цієї інфекції характеризується інтенсивним розмноженням вірусу в макрофагах, Т-і В-лімфоцитах і, як наслідок цього - розвиток в організмі хворої тварини імуносупресії. У цьому зв'язку успішне лікування фоспренілом чуми м'ясоїдних може пояснюватися запобіганням розвитку Вірусіндуцірованная імуносупресії або її корекцією при застосуванні препарату.

  Іншою важливою обставиною є той факт, що фоспренил поряд з імуномодулюючу активністю (ряд особливостей якої досі інтенсивно вивчаються) має пряму противірусну дію і ефект цієї дії залежить від будови вірусу. У наших експериментальних дослідженнях було чітко показано, що фоспренил значно пригнічує розмноження вірусу чуми м'ясоїдних в чутливій культурі клітин СНЕВ і, навпаки, не робить противірусної дії in vitro відносно парвовіруса (за даними, отриманими фахівцями ВГНКИ А.А.Ольшанской та ін) і аденовірусу (див. Таблицю 26).

  Ймовірно, при чумі м'ясоїдних фоспренил діє двояко: з одного боку як імуномодулятор, а з іншого - як препарат, здатний безпосередньо пригнічувати розмноження вірусу в органах і тканинах хворої тварини. Таким комплексним впливом фоспренила на вірусну інфекцію можна пояснити успіхи в лікуванні чуми м'ясоїдних, і навпаки - певні труднощі в лікуванні інфекцій, що викликаються парво-і аденовірусами.



  Пряму противірусну дію фоспренила

  Під прямим противірусною дією фоспренила ми розуміємо безпосередню порушення препаратом однієї або декількох основних фаз життєвого циклу вірусів: неспецифічне зв'язування фоспренила з вирионами поза клітини, перешкода сорбції вірусу на клітинах (блокування клітинних рецепторів на мембрані), порушення реплікації і збірки вірусних частинок усередині клітини, перешкода виходу віріонів з клітини.

  В експериментальних досліджень in vitro нам вдалося виявити здатність фоспренила пригнічувати розмноження цілого ряду ДНК-і РНК-вірусів, що грають важливу роль в патогенезі тварин і людини. Детальніше про ці експерименти можна ознайомитися і в інших публікаціях данниго автора і співавторів.

  У таблиці 26 представлені дані про противірусної дії ФП in vitro щодо вірусів, що грають важливу роль в інфекційній патології домашніх і сільськогосподарських тварин.

  Таблиця 26. Противірусна активність фоспренила 

 * - Реєструвалося навіть деяке незначне посилення розмноження вірусу в присутності фоспренила



  Насамперед відзначимо, що сам факт противірусної дії ФП in vitro щодо ДНК-і РНК-вірусів свідчить про наявність у фоспренила здатності порушувати одну або кілька фаз життєвого циклу цих вірусів. Виникає питання: на якому етапі (або етапах) взаємодії вірус-клітина проявляється антивірусну дію препарату? Необхідно зазначити, що виявлення цих етапів представляє досить складну проблему.

  Як видно з даних, наведених у таблиці, різниця між титрами вірусів у контролі та досвіді коливається від порівняно невеликий (10-кратне придушення розмноження вірусу хвороби Ауєскі в чутливій культурі клітин) до вельми значною (фоспренил знижує титри вірусів чуми м'ясоїдних та інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби більш ніж в 100 разів). Зауважимо, що у вірусологів в таких дослідах значною вважається різниця від 1,5 lg (30-кратне придушення розмноження вірусу) і більше.

  У ході експериментів ми виявили таку закономірність: якщо в культуру клітин спочатку вносити необхідну кількість ФП (як правило, 200 мкг / мл), потім залишати клітини контактувати з препаратом протягом різних проміжків часу (1:00, 2:00, 24 години або 48 годин ), а потім заражати вірусом, то ніякої різниці в титрах вірусу між контролем та досвідом не виявляється. Логічно припустити, що препарат не діє на етапі сорбції вірусу на клітини і не блокує специфічні для вірусу клітинні рецептори. Противірусний ефект препарату виявлявся лише в тих випадках, коли вірус і ФП вносили в культуру одночасно (або попередньо протягом нетривалого часу 0,5 години інкубували вірус з препаратом). Виходячи з отриманих результатів, нами була висунута гіпотеза про те, що фоспренил взаємодіє з вирионами поза клітини. Для перевірки цієї гіпотези ми провели серію експериментів, використовуючи реакцію прямої гемаглютинації. Ця методика була обрана нами, виходячи з ряду міркувань

  Було виявлено, що фоспренил володіє вираженою дозозалежної гемагглютінірующей активністю щодо еритроцитів гусака (ЕГ) і не володіє такою відносно еритроцитів собаки чи кішки. Добре відомо, що вірус кліщового енцефаліту агглютинирует ЕГ, тому реакція гальмування гемаглютинації у присутності противірусних антитіл давно використовується для визначення титрів антитіл до вірусу. У багаторазово повторених експериментах ми показали, що фоспренил блокує гемагглютінірующімі активність вірусу (так і навпаки: вірус гальмує гемаглютинацію ЕГ фоспренілом). Отримані дані, на наш погляд, підтвердили гіпотезу про те, що фоспренил може взаємодіяти з вирионами поза клітини, очевидно, утворюючи стійкі комплекси фоспренил-вірус, і тим самим перешкоджати зараженню чутливих клітин. Однак цей механізм прямого противірусної дії фоспренил - не єдиний.

  Виявилася також і інша закономірність.

  У всіх дослідах (незалежно від того, який вірус був об'єктом досліджень, і яка культура клітин використовувалася для розмноження вірусів) прояв цитопатичної дії вірусу в культурі у присутності фоспренила завжди реєструвалося на 24-48 годин пізніше, ніж у контрольних заражених клітинах навіть при високих дозах вірусу. Нас зацікавило питання: чи не змінює препарат вірулентність врожаю вірусу? Для відповіді на це питання ми протитрований урожай поза-і внутрішньоклітинного вірусу інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби (відноситься до герпесвірусами): а) контрольний, тобто отриманий без внесення фоспренила і б) експериментальний, отриманий на культурі, яку заражали вірусом у присутності фоспренила на свіжої культурі клітин. Виявилося, що титр врожаю вірусу у всіх контрольних пробах значно вище, ніж в таких, які заражали вірусом у присутності препарату. Причому ця різниця виразно виявлялася як в пробах, початково заражених високими дозами вірусу, де первинне прояв ЦПД візуально в світловому інвертованому мікроскопі виглядало однаково в контролі і досвіді, так і в пробах, інфікованих більш низькими дозами. Сумарно титри врожаю вірусу, отриманого в клітинах на тлі дії препарату, були на 3-4 lg менше, ніж урожай контрольного вірусу. Цей факт свідчить про іншому механізмі прямого противірусного ефекту препарату. Одним з пояснень цього факту може служити припущення, що на тлі дії фоспренила всередині клітини частина віріонів формуються дефектними (нездатними заражати інші клітини). Частковим підтвердженням цього припущення можуть бути попередні дані дослідження врожаю вірусу кліщового енцефаліту, отримані методом електронної мікроскопії. Так, було встановлено, що серед вірусних частинок в урожаї (після дії фоспренила) зустрічається безліч віріонів з розпушеному оболонкою і без оболонки. Чому ж віріони під впливом фоспренила формуються дефектними? Точної відповіді на це питання поки немає. Однак існують кілька гіпотез, які в даний момент знаходяться в стадії експериментальної перевірки.

  Іншим поясненням істотного зниження вірулентності врожаю вірусу при впливі фоспренила є можлива (опосередкована вірусами) стимуляція препаратом інтерферону (або інших внутрішньоклітинних вірусних інгібіторів). Тут доречно нагадати дані, наведені вище: при одночасному введенні в організм тварини вірусу і фоспренила спостерігається значна стимуляція ІФН. При цьому реалізація такого механізму противірусної дії ФП залежить з одного боку від культури клітин, а з іншого - від структури і особливостей внутрішньоклітинного циклу розмноження вірусу. Експериментальне підтвердження існування такого механізму антивірусної дії ФП змогло б пояснити деякі на перший погляд протиріччя, отримані в дослідах in vitro (див. таблицю 26):

  Чому фоспренил в такою різною мірою знижує розмноження "близькоспоріднених" (що належать до одного і того ж сімейства Herрesviridae) вірусів - вірусу хвороби Ауєскі в 10 разів, а вірусу інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби - більш ніж у 100 разів? У першому випадку титрування вірусу проводилося на первинній культурі курячих фібробластів, у другому - на перещеплюваної культурі клітин нирок теляти (Таурус 1). Якщо припустити, що фоспренил, внесений в культуру разом з вірусом, здатний якимось чином трансформувати клітинний метаболізм і стимулювати синтез інтерферону, то різниця в ступені противірусної активності ФП щодо цих вірусів пояснювалася б різною здатністю цих культур продукувати інтерферон. Аналогічним чином можна було б пояснити суттєві відмінності противірусної дії препарату щодо інших вірусів, отриманих на різних культурах клітин: кожна культура клітин в різного ступеня здатна під впливом препарату синтезувати інтерферон. Тут необхідно зазначити наступний цікавий факт: візуально культури клітин після внесення фоспренила виглядають дещо інакше, ніж контрольні, необроблені препаратом.


  Ще одна особливість противірусної активності препарату на етапах взаємодії вірус-клітина чітко простежується в даних, наведених у таблиці 26: пряму противірусну дію ФП виявляється тільки у відношенні вірусів, що містять зовнішню оболонку. Так, нами не було виявлено жодної противірусної активності ФП щодо аденовірусу великої рогатої худоби (штам В-10). Однак є дані, що фоспренил здатний пригнічувати розмноження аденовірусу собак 2-го типу in vitro.

  Чим можна пояснити відмінності в отриманих даних? З одного боку результати були отримані на різних культурах клітин, а ця обставина може мати значення, якщо підтвердиться гіпотеза про здатність ФП стимулювати інтерферон у певних культурах клітин. З іншого боку, в дослідах з аденовирусом великої рогатої худоби ми визначали здатність фоспренила запобігати розмноженню вірусу по прояву ЦПД в культурі. В експериментах з аденовирусом собак відмінності були виявлені за здатністю вірусу утворювати в культурі бляшки, а даний метод включає нанесення на культуру агарового покриття. Не виключено, що Агарові покриття збільшило контакт фоспренила з культурою і тим самим посилило його дію. Подібне пояснення побічно підтверджується даними, отриманими в дослідах in vivo: виявилося, що якщо ФП вводити разом з желатином (зразковим аналогом агару), противірусну дію препарату значно збільшується.

  Дані, наведені в цьому розділі, свідчать про здатність препарату комплексно діяти проти вірусної інфекції, як на рівні цілого організму (иммуномодуляция), так і на рівні взаємодії вірусів з клітинами-мішенями: зв'язуватися з вірусами поза клітинами, перешкоджаючи сорбції останніх на клітинних рецепторах, стимулювати синтез інтерферону всередині клітин, не виключено, що фоспренил порушує збірку віріонів на рівні гликозилирования вірусних білків усередині клітини (пряму противірусну дію). При цьому, залежно від конкретної вірусної інфекції, в організмі тварин фоспренил може здійснювати захисну дію як оптимальний імуномодулятор - у випадках інфекцій, що викликаються безоболочечний вірусами, а у випадках інфікування організму вірусами, що містять зовнішню оболонку - двояко: і як імуномодулятор, і як препарат прямого противірусної дії. Який з цих двох механізмів противірусної дії ФП виявляється вирішальним - належить з'ясувати в ході подальших експериментальних та клінічних досліджень.





  ОСОБЛИВОСТІ ЗАСТОСУВАННЯ фоспренила (І ДЕЯКИХ ІНШИХ ПРЕПАРАТІВ ВИРОБНИЦТВА ЗАТ "МІКРО-ПЛЮС") ДЛЯ ЛІКУВАННЯ І ПРОФІЛАКТИКИ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ КОШЕК

  У розділі "Вірусні інфекції кішок" досить докладно описані вірусні інфекції кішок: сказ, хвороба Ауєскі, інфекційна панлейкопенія, інфекційний ринотрахеїт, каліцівіроз, Коронавірусние інфекції, котячий грип, вірусна лейкемія кішок, котячий імунодефіцит, герпес. У справжньому розділі ми розглянемо деякі аспекти застосування ФП (а також препаратів максидин і гамавит) або можливості використання даних препаратів для лікування і профілактики деяких з перерахованих вище інфекцій, використовуючи (I) експериментальні та (II) клінічні дані.

  Ми провели серія експериментів з вивчення комплексної дії препаратів фоспренила (ФП) і максидин (МД) при зараженні мишей вірусно-кліщовим енцефалітом для створення оптимальної схеми профілактики і лікування даного захворювання при одночасному дії двох препаратів. Основним завданням досліджень було відпрацювання оптимальних доз зазначених препаратів, що мають при одночасному їх застосуванні максимальним протективного дією в інкубаційному періоді. У дослідах використовували ФП - 0,4% р-р серії № 1059 виробництва ЗАТ "Мікро-плюс" і МД - 0,4% р-р серії № 0028 виробництва ЗАТ "Мікро-плюс".

  Було зроблено ряд висновків.

  1.Препарати фоспренил і максидин в дозі 20 мкг / миша при одноразовому роздільному введенні володіють порівняно невисокою протективной активністю - захищають від кліщового енцефаліту не більше 20-30% тварин. Однак показники середньої тривалості життя тварин (СПР), яким вводили фоспренил або максидин, все ж збільшувалися в порівнянні з контролем.

  (Середня тривалість життя вираховувалася за формулою:

  7S 0 (А)

  СПР=------------, де

n



  7S 0 (A) - кількість живих мишей на кожен день інфекції протягом 14-и діб, n - загальне число мишей в групі).



  2.Совместное одночасне введення препаратів фоспренил і максидин в дозі 20 мкг / миша значно посилює протективний ефект - число тих, що вижили мишей збільшується до 60%, в той час як при використанні тільки фоспренила виживало лише 20% тварин, а тільки максидин - 30%. Показник середньої тривалості життя при спільному введенні обох препаратів значно (на 5,1 сут.) Перевищує контрольний.

  3. При використанні дози 100 мкг / миша, обидва препарати мають високу протективной активністю - фоспренил захищає 50% тварин, а максидин - 70%. При цьому ефект максидин більш виражений: показник середньої тривалості життя мишей, що отримали максидин, значно перевищує такий у тварин, яким вводили фоспренил (9,8 і 7,8 сут. Відповідно).

  4. При використанні обох препаратів одночасно в дозі 100 мкг / миша - противірусний ефект значно посилюється: процень вижили мишей збільшується до 90%, а показник середньої тривалості життя - до 10,5 сут., В той час, як при роздільному використанні фоспренила або максидин дані показники не перевищували значень 50-70% і 7,8 - 9,8 сут. відповідно.

  Результати проведених досліджень виявили чітко виражений взаємопідсилювати противірусний ефект спільного застосування фоспренила і максидин при експериментальному кліщовий енцефаліт у мишей. Спостережуваний ефект проявлявся, як при використанні дози 20 мкг, так і при дозі 100 мкг / миша.

  Отримані дані переконливо свідчили про перспективність спільного використання препаратів для посилення їх противірусної активності.



  Сказ

  Враховуючи експериментальні дані, безсумнівно перспективно використовувати ФП в якості ад'юванта інактивованої вакцини проти сказу, тобто вводити вакцину в організм тварини одночасно з ФП (з розрахунку 0,2 мл ФП на 1 кг маси тіла кішки). При цьому можливі кілька варіантів використання препарату залежно від того, яка вакцина використовується для щеплення тварини. Якщо вакцина моновалентная, тобто містить тільки один вірусний антиген, ФП доцільно вводити одноразово одночасно з вакцинацією (можливо використовувати препарат як розчинник для вакцини і ввести препарат і вакцину в організм в одному шприці). У тих випадках, коли кішку прищеплюють полівалентної вакциною, тобто, коли вакцина містить кілька компонентів (в тому числі живі аттенуіровані віруси), схема використання ФП рекомендується наступна: кішка слід вводити препарат двічі: за 5-7 днів до вакцинації - одноразово і за 24 години до введення вакцини - одноразово (з розрахунку 0,2 мл ФП на 1 кг маси тіла кішки).

  Хвороба Ауєскі

  Експериментально встановлено, що ФП має здатність пригнічувати розмноження герпесвірусу - збудника хвороби Ауєскі в чутливій культурі клітин (див. таблицю 26). Аналогічної здатність має, згідно з дослідженнями Ільченко Е.Д. і співавт. (2001), препарат максидин володіє подібним дією. Експериментальні дані, отримані на лабораторних тварин, заражених вірусом кліщового енцефаліту, показали, що одночасне введення в організм тварин фоспренила і максидин (МД), значно посилює противірусний ефект обох препаратів. Цей факт, на нашу думку, обгрунтовує новий підхід до лікування, що полягає в комплексному використанні ФП і МД для лікування та профілактики вірусних інфекцій. Особливо ефективний такий спосіб може бути на ранніх стадіях інфекції, так як МД є потужним стимулятором ІФН-? -? -?. Однак не виключено, що успішне лікування при одночасному використанні ФП і МД (у поєднанні з гамавита) буде досягнуто і на більш пізніх термінах клінічно вираженої інфекції.

  Інфекційна панлейкопенія

  Останнім часом для лікування гострої форми панлейкопении успішно застосовують ФП (ін'єкції 0,5-0,6 мл / кг) щодня 2 рази на добу з одночасним введенням МД (ін'єкції 0,1-0,2 мл / кг) щодня 2 рази на добу і гамавита (0,3 мл / кг) щодня 1 раз на добу. При цьому для підтримки діяльності серця використовується кокарбоксилаза, а для боротьби з зневоднюванням - розчин Рінгера. Для профілактики ускладнень використовуються антибіотики цефалоспоринового або пеніцилінового ряду (цефал-куре, альбіпен ЛА, неоп та ін.) Така схема лікування, за даними ветлікаря Е.Третьяковой, призводить до ізлечіванію 100% кішок протягом 3-5 діб.



  Інфекційний ринотрахеит

  Як засіб етіотропної терапії інфекційного ринотрахеїту досить успішно зарекомендував себе максидин (Ільченко Е.Д. і співавт., 2001). Препарат застосовують підшкірно по 0,5 мл 2 рази на день протягом 5-и днів (оскільки препарат болючий, кошенятам вводять його разом з 0,5% новокаїном). При такому методі лікування поліпшення настає вже на 3-ій день після початку лікування, а до 5-7-ї доби в 87% випадків спостерігається повне одужання. Однак при використанні в якості засобу етіотропної терапії тільки максидин в 13% випадків може спостерігатися хронізація вірусного інфекційного процесу, і одужання наступає лише через 2-3 тижні після початку лікування. Для підвищення ефективності лікування останнім часом використовують максидин в поєднанні з фоспренілом. При цьому схема застосування максидин залишається такою ж, як описано вище, а фоспренил застосовують перорально в дозі 0,5 - 1 мл 1 раз на день протягом 2-х днів з поєднанні з щоденною обробкою слизової язика і піднебіння (у випадках виразки), а також використовують максидин у формі очних крапель у випадках гнійних витікань з очей. Така схема етіотропної терапії дає практично 100%-ве вилікування вже на 4-5-й день, при цьому не спостерігається випадків хронічної інфекції. Підвищення ефективності лікування за допомогою одночасного застосування обох препаратів може, на нашу думку, пояснюватися тим обставиною, що кожен з них окремо, згідно з експериментальними даними, володіє противірусні дією відносно вірусу герпесу. Логічно припустити, що при застосуванні максидин і фоспренила спостерігається сінергістичним ("подвоєний") противірусний ефект.

  Каліцівіроз

  Як ефективних лікувальних препаратів, насамперед, можна рекомендувати максидин в поєднанні з фоспренілом (за схемою, описаною вище для лікування інфекційного ринотрахеїту). Однак механізм (або механізми) лікувальної та профілактичної дії цих препаратів при каліцівірозе, мабуть, відрізняється від такого при інфекційному Ринотрахеит. Збудником останнього є каліцівіруси, що не містять оболонки. Як було зазначено вище, фоспренил не володіє прямою противірусною дією (принаймні, в експериментах in vitro) щодо безоболочечних вірусів, таких, наприклад, як аденовірусів і вірусу поліомієліту. У теж час в дослідах in vivo показано, що фоспренил захищає від високолетальной інфекції, спричиненої вірусом поліомієліту (представником пикорнавирусов) до 50% мишей в разі введення препарату в організм тварин одночасно з вірусом. Не виключено, що лікувально-профілактичний ефект препарату в разі каліцівіроза з одного боку може бути обумовлений иммуностимулирующим його дією (описаним вище), так як мішенями для вірусу є імунокомпетентні клітини підщелепних лімфовузлів. З іншого боку, лікувальну дію фоспренила може пояснюватися нормалізацією структур і функцій клітин, уражених вірусом.

  На закінчення слід зазначити, що препарат, безумовно, не є байдужим для організму: збільшується навантаження на серце, у тварин з підвищеною схильністю до алергії іноді можуть спостерігатися алергічні реакції. Але оскільки препарат призначається у поєднанні з симптоматичною терапією, що включає препарати, що збільшують оксигенацію серцевого м'яза і / або збільшують її кровопостачання, а також антигістамінні та гепатопротекторні препарати, то ймовірність прояву побічних явищ різко знижується. При цьому фоспренил є практично нешкідливим препаратом: гостра токсичність (LD50) для мишей і щурів спостерігається лише при введенні препарату в дозі, в 25000 разів перевищує середню терапевтичну. 
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
 Інформація, релевантна "Механізм противірусної ДІЇ фоспренила: ПРИНЦИПИ ПРОФІЛАКТИКИ ТА ЛІКУВАННЯ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ"
  1.  ВСТУП
      Бог створив кішку для того, щоб у людини був тигр, якого можна погладити. В.Гюго У наші дні кількість людей, що мають або бажають завести домашню кішку, значно збільшилася. Причому мова йде не тільки про породистих, дорогих кішках, а й просто - про супутницю життя.
  2.  Гнійно-запальні післяпологові ЗАХВОРЮВАННЯ
      Післяпологові інфекційні захворювання - захворювання, які спостерігаються у породіль, безпосередньо пов'язані з вагітністю та пологами і обумовлені бактеріальною інфекцією. Інфекційні захворювання, виявлені в післяпологовому періоді, але патогенетично не зв'язані з вагітністю та пологами (грип, дізентірея та ін), до групи післяпологових захворювань не відносять. ЕТІОЛОГІЯ І ПАТОГЕНЕЗ
  3.  3. ПИТАННЯ ДО ІСПИТУ
      Розділ 1. Загальна частина Морфологія мікроорганізмів 1. Основні принципи класифікації мікробів. 2. Морфологічні та тинкторіальні властивості бактерій. Методи забарвлення. 3. Структура та хімічний склад бактеріальної клітини. Особливості будови грампозитивних і грамнегативних бактерій. 4. Морфологія грибів. Принципи класифікації. 5. Морфологія найпростіших. Принципи
  4.  Пневмонії
      ПНЕВМОНІЯ (Пн) - гостре інфекційне ураження нижніх відділів дихальних шляхів, підтверджене рентгенологічно, домінуюче в картині хвороби і не пов'язане з іншими відомими причинами. У визначенні Пн підкреслюється гострий характер запалення, тому немає необхідності вживати термін «гостра пневмонія» (в Міжнародній класифікації хвороб, ухваленій Всесвітньою організацією
  5.  Міокардит
      МІОКАРДИТ - запальне ураження міокарда, викликане інфекційними, токсичними або алергічними впливами. Міокард пошкоджується при прямому впливі інфекційного або токсичного агента або непрямим шляхом - опосередкованим за механізмом попередньої алергізації або аутоімунізації серцевого м'яза. У даному розділі розглядається неревматичний міокардит (про ревматичному
  6.  Загальні положення
      Захворюваність населення різними вірусними інфекціями неухильно зростає з кожним роком. Винятком не стають і жінки в період вагітності. При цьому гострі (первинні) вірусні інфекції можуть призводити як до втрати вагітності, так і до народження дітей з різними порушеннями в розвитку. Хронічні (латентні інфекції), які часто прогресують на тлі гестаційної імуносупресії,
  7.  ПРИНЦИПИ ВІРУСОЛОГІЇ
      Кеннет Л. Тайлер, Бернард Н. Філдс (Kenneth L. Tyier, Bernard N. Fields) Структура і класифікація вірусів. Типова вірусна частка (вирион) містить ядро, що складається з нуклеїнової кислоти - ДНК або РНК. Існує значна варіабельність структур і розмірів вірусних нуклеїнових кислот (табл. 128-1). Геноми з мінімальною мовляв. масою, як, наприклад, у парвовирусов, налічують 3-4
  8.  ПРИНЦИПИ ПРОТИВІРУСНОЇ ХІМІОТЕРАПІЇ
      Рафаел Долін (Raphael Dolin) Вступ. Використання противірусних з'єднань для хіміотерапії та хіміопрофілактики вірусних хвороб являє собою відносно новий розділ у вченні про інфекційні хвороби, особливо якщо порівняти його з більш ніж 40-річним досвідом використання протибактерійних антибіотиків. Принципи, що лежать в основі застосування противірусних з'єднань, були
  9.  ХВОРОБИ ЩИТОВИДНОЇ ЗАЛОЗИ
      Сідней Г. Інгбар (Sidney H. Ingbar) Нормальна функція щитовидної залози спрямована на секрецію L-тироксину (Т4) і 3,5,3 '-трійод-L-тіроніна (Т3) - йодованих амінокислот, які представляють собою активні тиреоїдні гормони і впливають на різноманітні метаболічні процеси (рис. 324-1). Захворювання щитовидної залози проявляються якісними або кількісними змінами секреції
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...