Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
ГоловнаМедицинаВетеринарія
« Попередня Наступна »
Гусаров Г.Н ., Корягіна В.Н.. Визначення хімічного складу та експертиза риб і рибних продуктів, 2006 - перейти до змісту підручника

ВИЗНАЧЕННЯ ПРОТЕЇНУ

Наявність протеїну в тому чи іншому досліджуваному матеріалі встановлюють на основі кількісного визначення загального азоту. Зміст же останнього можна встановити методом К'ельдаля. Цей метод полягає в тому, що органічні речовини при нагріванні з концентрованою сірчаною (Н2SО4) кислотою руйнуються, а весь аміак вловлюється кислотою, утворюючи з нею сірчанокислий амоній. З отриманої солі аміак витісняється міцною лугом і надходить під дією водяної пари в титрований розчин сірчаної кислоти, де він знову утворює сірчанокислий амоній. Потім залишилася в цьому розчині вільну сірчану кислоту нейтралізують титрованим розчином NaOH або каонних, що дає можливість дізнатися, скільки азоту укладено в аміаку, прореагувати з кислотою. Встановивши кількість азоту в навішуванні досліджуваного матеріалу, обчислюють кількість протеїну, приймаючи при цьому середній вміст в ньому азоту 16%.

Хід визначення

1. Насипати в пробірку близько 200 ... 300 мг досліджуваного матеріалу, що знаходиться в повітряно-сухому стані, і зважити її на аналітичних вагах.

Якщо визначення протеїну проводиться безпосередньо в сирій пробі, то беруть на аналіз 1 ... 1,5 г досліджуваного матеріалу.

2. Перенести вміст пробірки на дно колби К'ельдаля, призначеної для спалювання органічних речовин.

3. Зважити порожню пробірку, а потім по різниці між масою пробірки з вмістом і масою спорожнені пробірки встановити величину навішування, вміщеній в колбу.

4. Відміряти в циліндрі 5 ... 10 см3 концентрованої сірчаної кислоти і облити нею вміщену в колбу навішення.

5. На кінчику шпателя додати в колбу в якості каталізатора близько 100 мг мідного купоросу, а потім прикрити її скляною пробкою (втулкою).

6. Колбу разом з вмістом поставити на нагрівальний прилад (електроплитку або газовий пальник) в витяжну шафу і приступити до спалювання органічних речовин спочатку на слабкому вогні, а потім, посиливши вогонь, довести вміст колби до повного освітлення. Зазвичай спалювання триває кілька годин.

7. Вимкнути нагрівальний прилад і дати колбі охолонути.

8. Дуже обережно маленькими порціями прилить в колбу по її стінках невелика кількість дистильованої води і знову перемішати.


9. Перелити вміст колби К'ельдаля в мірну колбу ємністю 100 ... 250 мл.

10. Колбу К'ельдаля кілька разів промити дистильованою водою, яку злити в ту ж мірну колбу.

11. У мірну колбу долити до мітки дистильованої води.

12. Закрити мірну колбу пробкою і зробити декілька вертикальних перемішувань її вмісту.

13. Налити з микробюретки в сто-, двухсотмілліметровую конічну вузькогорлих приймальню колбу 5 ... 15 мл 0,01 - нормального розчину сірчаної кислоти, додати дві краплі двобарвного індикатора і поставити колбу під холодильник апарату К'ельдаля. Простежити за тим, щоб кінець трубки холодильника був занурений у відведені кількість 0,01-нормального розчину сірчаної кислоти.

14. Взяти піпеткою з мірної колби 10 ... 25 мл аналізованої рідкої проби і перелити її в отгонную колбу, вмонтовану в апарат К'ельдаля за допомогою шліфа, що з'єднує її з насадкою.

15. Налити через воронку 6 (див. рис.1) в парообразователь апарату К'ельдаля дистильованої води не більше 2/3 об'єму колби і включити нагрівальний прилад.

16. Після того як вода в пароутворювачем закипить, відкрити кран воронки 15 і влити через неї в отгонную колбу 5 ... 10 мл 33-процентного розчину їдкого натру.

17. Не чекаючи того моменту, коли вся луг пройде по трубці в отгонную колбу, промити дистильованою водою воронку і закрити її кран.

18. Отгонку аміаку продовжувати 10 ... 20 хв. За цей час аміак, як правило, переходить з отгонной колби до приймальні. Для того, щоб переконатися, що весь аміак перейшов до приймальні колбу, зазвичай користуються лакмусовим папірцем, який від краплі відгону не повинна змінювати свій колір.

19. Промити кінець трубки холодильника дистильованою водою, зливаючи воду в приймальню колбу.

20. Відняти приймальню колбу від холодильника, а потім включити нагрівальний прилад.

21. Відтитрувати вміст приємний колби 0,01 - нормальним розчином їдкого натру.

22. З числа мілілітрів 0,01-нормального розчину сірчаної кислоти, спочатку взятого в приймальню колбу, відняти число мілілітрів 0,01-нормального розчину їдкого натру, який пішов при титруванні на нейтралізацію вільної кислоти, в результаті чого буде отримано число мілілітрів 0,01-нормального розчину сірчаної кислоти, який пішов на зв'язування аміаку.


23. Помножити 0,14 на число мілілітрів 0,01-нормального розчину сірчаної кислоти, нейтралізовані аміаком. Твір покаже кількість міліграмів азоту, яке містилося в аміаку, відігнавши з 10 ... 25 мл аналізованої рідкої проби.

24. Встановивши масу азоту в відігнати аміаку, визначити шляхом арифметичного перерахунку загальна кількість азоту в усьому обсязі досліджуваної рідкої проби, що знаходиться в мірній колбі. В результаті буде отримано кількість азоту, яке містилося в спаленої навішуванні аналізованого матеріалу.

25. Визначити відсоток азоту в повітряно-сухій речовині аналізованої проби за формулою:



а х 100

Хо=----------, де

Р2



Хо - відсоток азоту в повітряно-сухій речовині;

а - маса азоту в узятій на аналіз навішуванні повітряно-сухої речовини;

Р2 - навішування повітряно-сухої речовини, взята на аналіз.

26. Порівняти отриману величину відсотка азоту в повітряно-сухій речовині аналізованої проби з величиною відсотка паралельного визначення. Допустиме розходження в даних величинах не повинно перевищувати 0,15%.

27. Прийняти середнєарифметичну величину двох паралельних визначень за відсоток азоту в повітряно-сухій речовині аналізованої проби.

28. Помножити відсоток азоту, встановлений для повітряно-сухої речовини аналізованої проби, на коефіцієнт 6,25. У результаті буде отриманий відсоток протеїну в повітряно-сухій речовині даної проби.

29. Встановити за допомогою перерахунку відсоток протеїну в абсолютно сухій речовині аналізованої проби за формулою:



Хо х 100

Х=------------ , де

100 - В 1



Х - відсоток протеїну в абсолютно сухій речовині;

Хо - відсоток протеїну в повітряно-сухому речовині;

В1 - відсоток гігроскопічної вологи в повітряно-сухій речовині.



30. Встановити за допомогою перерахунку відсоток протеїну в сирому матеріалі аналізованої проби за формулою:
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна "ВИЗНАЧЕННЯ ПРОТЕЇНУ"
  1. Контрольні питання
    Яка кількість риб береться при складанні середньої проби? 2. Температура, при якій проводять висушування середніх проб риб. 3. При якій масі риб проводять визначення хімічного складу в сирому матеріалі? 4. Яка маса сирої проби береться при визначенні протеїну? 5. Маса наважки сирої проби, необхідна для визначення
  2. ПРИГОТУВАННЯ РЕАКТИВІВ
    Чим правильніше приготовлені реактиви, тим точніше будуть показники по проробленому хімічному аналізу. У зв'язку з цим зупинимося на техніці приготування деяких реактивів, найбільш часто вживаних при кількісному визначенні протеїну і
  3. фрутаріанство і вегетаріанство
    У попередніх розділах було показано перевагу виключно рослинної їжі перед м'ясний або загальноприйнятою змішаної дієтою. Однак слід дещо додати. У природі, принаймні, в районі помірного клімату, тварини, які утворюють зимові запаси їжі, мають значно більше шансів на виживання, ніж хижі тварини, які змушені розраховувати тільки на вбивство для збереження
  4. РЕВМАТОЇДНИЙ АРТРИТ . ХВОРОБА БЕХТЕРЕВА
    Ревматологія як самостійна науково-практична дисципліна формувалася майже 80 років тому у зв'язку з необходімостио більш поглибленого вивчення хвороб цього профілю, викликаної їх широким розповсюдженням і стійкою непрацездатністю. У поняття "ревматичні хвороби" включають ревматизм, дифузні захворювання сполучної тканини, такі як системний червоний вовчак, системна
  5. деформуючого остеоартрозу. ПОДАГРА.
    Деформуючого остеоартрозу (ДОА). У 1911 році в Лондоні на Міжнародному конгресі лікарів всі захворювання суглобів були розділені на дві групи: первинно-запальні та первинно-дегенеративні. Ревматоїдний артрит і хвороба Бехтерева відносяться до першої групи. Представником другої групи є деформуючого остеоартрозу (ДОА), що представляє собою: дегенеративно-дистрофічних захворювань
  6. ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТ
    Гломерулонефрит є основною проблемою сучасної клінічної нефрології, найчастішою причиною розвитку хронічної ниркової недостатності. За даними статистики, саме хворі на гломерулонефрит становлять основний контингент відділень хронічного гемодіалізу та трансплантації нирок. Термін "гломерулонефрит" вперше запропонував Klebs, який застосував його в "Керівництві по
  7. ЛІКУВАННЯ
    гострих пневмоній має бути по можливості раннім, раціональним, індивідуальним і комплексним. Компоненти лікувального комплексу повинні бути наступними: боротьба з інфекцією і інтоксикацією, активізація захисних сил організму, нормалізація порушених функцій органів і систем, посилення регенеративних процесів. Хворі з гострою пневмонією підлягають лікуванню в умовах стаціонару. Постільний режим
  8. ХРОНІЧНИЙ БРОНХИТ . хронічним легеневим серцем.
    За останні роки, у зв'язку з погіршення екологічної ситуацією, поширеністю куріння, зміною реактивності організму людини, відбулося значне збільшення захворюваності хронічними неспецифічними захворюваннями легень (ХНЗЛ). Термін ХНЗЛ був прийнятий в 1958 р. в Лондоні на симпозіумі, скликаному фармацевтичним концерном "Ciba". Він об'єднував такі дифузні захворювання
  9. ШЛЯХИ ЗНИЖЕННЯ ЛЕТАЛЬНОСТІ ПРИ пізньогогестозу
    Типові помилки при веденні вагітних з пізніми гестозами: 1. недооцінка важкості стану в жіночій консультації 2. несвоєчасна госпіталізація 3. неадекватна терапія 4. запізніле розродження в умовах стаціонару 5. нераціональне ведення пологів. Після пологів у таких жінок розвивається найважча еклампсія, компенсаторно-пристосувальні функції при цьому
  10. ВАГІТНІСТЬ І ПОЛОГИ ПРИ СЕРЦЕВО-СУДИННИХ ЗАХВОРЮВАННЯХ, анемії, захворюваннях нирок, цукровому діабеті, вірусному Гіпатії, ТУБЕРКУЛЬОЗ
    Одне з найважчих екстрагенітальних патологій у вагітних є захворювання серцево-судинної системи, і основне місце серед них займають вади серця. Вагітних з вадами серця відносять до групи високого ризику материнської та перинатальної смертності та захворюваності. Це пояснюють тим, що вагітність накладає додаткове навантаження на серцево-судинну систему жінок.
© medbib.in.ua - Медична Бібліотека