Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
ГоловнаМедицинаВетеринарія
« Попередня Наступна »
Балджи Ю.А., Майканом Б.С., Жанабаева Д.К.. Ветеринарно-санітарна експертиза продуктів тваринництва при контамінації сторонніми речовинами., 2009 - перейти до змісту підручника

Визначення фенолів, бенз (а) пірену, нітратів і нітритів у м'ясних продуктах

Мета заняття: Вивчити методи визначення фенолів і бенз (а) пірену в копчених м'ясних продуктах



Завдання:

1. Підготувати досліджувані проби

2. Визначити межі проникнення фенолів у ковбасних виробах

3. Вивчити якісні і кількісні методи визначення бенз (а) пірену

4. Вивчити методи визначення нітратів і нітритів



Визначення фенолів у копчених м'ясних продук-тах



Об'єкти дослідження. Копчені ковбасні вироби різного групового асортименту або копченості.

Матеріали, реактиви та обладнання. Розчин ацетону масовою часткою 50%; розчин тетраборату натрію масовою часткою 0,5%; розчин 4-аміноантипірину масовою часткою 2%; розчин гексаціаноферрата калію (II) масовою часткою 8%; гваякол (для побудови каліброчного графіка); розчин персульфата амонію масовою часткою 20%; розчин карбонату натрію масовою часткою 1%; проявник; фільтрувальний папір; дистильована вода; фотоелектроколориметр ФЕК-56М або КФК-2; мірні колби місткістю 50 см3; мірний циліндр місткістю 150 см3; піпетки місткістю 1, 5, 10 см3; колориметрические пробірки; конічна колба місткістю 250 см3; скляна паличка; паперовий фільтр «синя стрічка»; ваги технічні, вібровстряхіватель; гідроксид натрію NaOH і його водний розчин молярної концентрацією 0,1 моль/дм3; сірчана кислота H2SO4 та її розчин масовою часткою 25%; сульфат цинку ZnSO4 і його водний розчин масовою часткою 0,45%; нітрит натрію NaNO2 і його свіжоприготований водний розчин масовою часткою 0,5%; гідроксид амонію NH4OH і його розчин масовою часткою 10%; стандартний водний розчин фенолу (з=1 мг / см3).



Методичні вказівки. Фенольні сполуки мають токсичну і навіть канцерогенну дію, у зв'язку з чим кількість їх у харчових продуктах має бути зведено до мінімуму. Для гарантії екологічної чистоти харчових продуктів необхідно суворо контролювати вміст фенолів.

При копченні феноли спочатку інтенсивно накопичуються в по-поверхневому шарі. Надалі проникнення їх в ковбасу значно сповільнюється. Одночасно відбувається дифузія фенольних компонентів диму у внутрішні шари ковбаси. На останній стадії копчення і сушіння кількість фенольних сполук у поверхневому шарі зменшується майже наполовину і помітно зростає у всіх внутрішніх шарах ковбасного батона. Фронт проникнення фенольних сполук всередину ковбасного батона тісно пов'язаний з хімічним складом сировини і технологічними режимами про-виробництва копчених виробів і характеризує якість копчення. Наприклад, феноли добре розчиняються в жирі. У жировій тканині їх в 1,5 рази більше, ніж в м'язовій. У процесі холодного копчення в копченині накопичується в середньому 15 мг% (9-24 мг%) фенолів.

При вивченні питання про швидкість і характер проникнення фе-нолов в ковбасні вироби зручно користуватися методом відбитків, розробленим співробітниками кафедри аналітичної хімії Воронезької державної технологічної академії, який заснований на розвитку якісної реакції фенолів у присутності карбонату натрію і спеціального проявника.

Кількісне визначення фенолів у ковбасних виробах про-водять одним з колориметрических методів. Сумарне визначення вмісту фенолів засноване на вимірюванні оптичної щільності забарвленого розчину, колір якого виникає в результаті якісної реакції.

Інший метод сумарного визначення вмісту фенолів заснований на отриманні нитрозосоединений при взаємодії фенолу з нітритом натрію. У результаті реакції нитрозосоединений утворює з надлишком аміаку продукт, забарвлений в жовтий колір, який потім фотоэлектроколориметрируют.

Підготовка проб. Зразки продуктів (не менше 500 г) двічі подрібнюють на м'ясорубці.

Перед визначенням фенолів у копчених виробах проводять органолептичну оцінку продуктів. При цьому оглядають поверхню ковбасного батона, відзначають вид ковбасної оболонки, груповий асортимент та найменування ковбаси (за допомогою викладача). Шляхом візуальної оцінки встановлюють колір, стан поверхні на розрізі, запах і смак. Дані фіксують у таблиці результатів.



Визначення меж проникнення фенолів

Приготування реактивів і матеріалів. Фільтрувальний папір для визначення меж проникнення фенолів. Фільтрувальний папір занурюють на 20-30 с в розчин Na2CO3 масовою часткою 1%, після чого її сушать на повітрі і зберігають.

Проявитель для визначення меж проникнення фенолів. 1 г 4-аміноанті-Пірину розчиняють у 50 см3 розчину етанолу (96 об.%).

Порядок проведення аналізу. Отриманий зі зрізу копченої ковбаси відбиток проникли фенолів повинен бути видимим і отли-чаться за кольором від фону заздалегідь підготовленій фільтрувального паперу. Підготовлену фільтрувальний папір обприскують з пульверизатора проявником і щільно притискають до зрізу ковбасного батона. Через 20-30 з папір відокремлюють від поверхні зрізу ковбаси і обприскують розчином персульфата амонію масовою часткою 20%. Через 2 хв на папері утворюється виразний, пофарбований у рожевий колір відбиток кордонів проникнення фенолів. Відбиток замальовують, вимірюють з точністю до 0,1 мм кордону проникнення або акуратно вирізують ножицями і вносять в таблицю результатів.

Крім цього методу існує колориметричний метод кількісного визначення фенолів на основі кольорової реакції з 4-аміноантипірину і Гексаціаноферрат калію (ii), колоріметріче-ський метод, заснований на отриманні нитрозосоединений при взаємодії фенолу з нітритом натрію



Визначення бенз (а) пірену в копчених м'ясних продуктах



Об'єкти дослідження. Ковбасні вироби різного групового асортименту: варені, варено-копчені, напівкопчені, сирокопчені, а також копченості.

Матеріали, реактиви та обладнання. Петролейний ефір, суміш хло-роформ-петролейний ефір (1:2), н-октан, рідкий азот, колонка скляна довжиною 120-140 мм, хроматографічна колонка (або пластинка), посудину Дьюара, ртутно-кварцова лампа ДРШ-250, ДРШ -50 (або ПРК-2), фільтр УФС-1 (або УФС-2), спек-трограф ІСП-51, еталонне речовина (1,12-бенз-перил), чистий бенз (а) пірен, ма-сорубка, етанол, етиловий ефір, дистильована вода, безводний Na2SO4, оксид алюмінію, бензол.



Методичні вказівки. Поліциклічні ароматичні вуглеводні (ПАВ) присутні в продуктах рослинного походження, копчених ковбасах і копченині Одним з найбільш відомих представників ПАУ є бенз (а) пірен (БП), вміст якого в копчених і напівкопчених ковбасах коливається від 1 мкг до декількох десятків мікрограмів на 1 кг продукту, а у варених - від 0,2 до 1,0 мкг / кг.

Для кількісного визначення канцерогенних ПАУ в харчових продуктах широке застосування знайшли люмінесцентні методи дослідження. Визначення бенз (а) пірену та інших канцерогенних ПАВ проводиться по тонкій структурі спектра флуоресценції при низькій температурі.

Флуоресцентних-спектральний метод визначення бенз (а) пірену включає кілька етапів витяг з наважкипродукту фракції, що містить ПАУ; очистку отриманої фракції від домішок і хроматографічне розділення ПАУ; якісне визначення БП та інших ПАУ за спектрами люмінесценції при температурі рідкого азоту; кількісне визначення БП за допомогою однієї з модифікацій спектрально-флуоресцентного методу (методом добавок або методом внутрішнього стандарту).

При виконанні всіх етапів виділення, очищення і фракционируют-вання ПАУ межа чутливості методу дорівнює 0,1-0,2 мкг / кг. По-грешность досвіду становить ± 10-15%.

Якісне визначення БП проводять спектральним методом з використанням ефекту Е.В. Шпольського. При температурі мінус 196 ° С отримують спектри люмінесценції окремих фракцій ПАУ, розчинених у нормальних парафінових вуглеводнях. Спектри мають тонку структуру і називаються квазілінейчатий.

Підготовка проб. З копченого продукту попередньо готують фарш шляхом подрібнення на м'ясорубці. До 1 кг фаршу доливають 1 дм3 етанолу, додають 150-250 г КОН (залежно від вмісту жирів у продукті) і кип'ятять 1,5-2 год для омилення ліпідів. Потім доливають 3-5-кратний обсяг дистильованої води і екстрагують неомиляемие речовини етиловим ефіром. Перша порція ефіру повинна бути в 4-5 разів більше обсягу обробляли розчину. Наступні три-чотири порції ефіру повинні бути в 3 рази більше перших.

Ефірний екстракт кілька разів промивають дистильованою водою, підкисляючи першу порцію води, потім сушать над безводним Na2SO4. Ефір відганяють, залишок розчиняють в бензолі і пропускають через колонку довжиною 120-140 мм, заповнену оксидом алюмінію. Адсорбовані в колонку ПАУ, відокремлені від інших неомильних речовин, елюіруют бензолом до тих пір, поки не припиниться виділення фракції з синьою флуоресценцією. Бензол відганяють з елюату, а залишок фракционируют колоночной або тонкошарової хроматографії.

Виділену суміш ПАУ, що містить деякі домішки, розчиняють в 10-15 см3 петролейного ефіру і наносять на заповнену оксидом алюмінію колонку діаметром 10-14 мм і висотою 120-140 мм. Флуоресціюючі фракції ПАУ спочатку елюіруют петролейним ефіром, а потім з додаванням бензолу.
Бенз (а) пірен міститься в III, IV або V фракціях. Для більш чіткого відділення бенз (а) пірену можна повторити фракціонування колоночного методом або в тонкому шарі оксиду алюмінію. При використанні другого методу як розчинник служить суміш хлороформ - петролейний ефір у співвідношенні 1:2.



Якісне визначення бенз (а) пірену

Порядок проведення аналізу. Для якісного визначення БП використовують суміш, що складається з 1 см3 бензольного екстракту і 2 см3 н-октана. Пробірку з сумішшю поміщають в посудину Дьюара з рідким азотом. Збуджують люмінесценцію за допомогою ртутно-кварцової лампи ДРШ-250 (ДРШ-50 або ПРК-2), пропускаючи УФ-випромінювання через фільтр УФС-1 або УФС-2. При визначенні тільки БП (якщо інші фракції ПАУ не визначають) можна користуватися також УФС-3 або УФС-4. Для запису спектру зазвичай використовують спектрограф ІСП-51 з камерою?=270 мм. У спектрі замороженого н-октанового розчину БП є характерні квазілінійно при довжинах хвиль 403,0 та 408,5 нм.





Кількісне визначення бенз (а) пірену

Порядок проведення аналізу. Кількісне визначення БП проводять за допомогою флуоресцентно-спектрального методу. Воно може бути виконане з використанням однієї з двох модифікацій, за допомогою добавок і установкою приладу по фону, створюваному люминесцирующими домішками, що містяться в досліджуваному екстракті, або за допомогою внутрішнього стандарту

При визначенні бенз (а) пірену за допомогою першої із зазначених модифікацій досліджуваний розчин порівнюють нема з розчином чистого бенз (а) пірену, а з таким же досліджуваним, але сильно розведеним розчином при додаванні в нього певної кількості чистого бенз (а) пірену (масовий надлишок), на світіння якого сторонні речовини впливають так само, як і в досліджуваному розчині.

При визначенні БП за допомогою внутрішнього стандарту в бенз (а) піреновую фракцію вводять чистий еталон, що дає хороший квазілінейчатий спектр в аналогічних умовах, причому в спектрі цієї речовини не повинно бути ліній, що перекриваються з аналітичними лініями бенз (а) пірену. Таким речовиною (стандартом) зазвичай служить 1,12-бензперілен. У спектрі Е.В. Шпольського н-октанового розчину 1,12-бензперілена є чітка лінія при?=406,3 нм, яка розташовується між відповідними лініями бенз (а) пірену, а поблизу аналітичних ліній бенз (а) пірену в спектрі 1,12-бензперілена помітні лінії відсутні. Стандарт вводять для порівняння і в еталонні розчини БП. У досліджуваному розчині вимірюють відношення інтенсивності лінії БП і доданого речовини. Користуючись раніше визначеним за «розчинів-свідкам» ставленням інтенсивності ліній для відомих концентрацій БП і речовини-стандарту і знаючи кількість доданого стандарту, знаходять кількість БП в бенз (а) піреновой фракції, виділеної з продукту.

Отримані результати зводять в таблицю:





Отримані дані аналізують, формулюють висновки і дають санітарно-гігієнічну оцінку копчених м'ясних продуктів.

Визначення нітратів і нітритів



Об'єкти дослідження. М'ясо різних видів забійних живіт-них та птиці; субпродукти I і II категорій, ковбасні вироби, продукти зі свинини, яловичини, баранини, м'яса птиці; консерви, при виготовленні яких застосовують нітрит натрію.



Методичні вказівки. Серед переліку токсичних і шкідливих речовин, що виявляють у сировині та продуктах, велике практичне значення має визначення нітрат-і нітрітіонов, джерелами яких служать корму тварин і власне нітрит, який додається для імітації кольору при виробництві м'ясних продук-тов.

Проблема виробництва екологічно чистих продуктів харчування пов'язана з реалізацією інструментальних методів контролю шкідливих речовин, що застосовуються в умовах виробництва та мають достатній-ную точність і експресному. Існуючі фотоколориметричні, хроматографічні, спектрофотометричні та хімічні методи визначення нітратів і нітритів не відповідають повною мірою вимогам і умовам виробничих лабораторій. Методики мають ряд недоліків: тривалість, використання токсичних і дефіцитних реактивів, дорогої апаратури, певний рівень вимог до кваліфікації оператора для виконання робіт і т. д. У порівнянні з перерахованими іоноселектівний метод визначення нітрат-і нітрит-іонів має ряд достоїнств, насамперед пов'язаних з малою тривалістю, точністю і простотою визначення, а також компактністю приладів.

  Залежно від рівня матеріальної бази в аналітичній практиці можуть бути застосовані ті чи інші методи. Принципи і основна суть їх викладені нижче.

  Іонометріческіх метод визначення нітрат-і нітрит-іонів передбачає використання іоноселективного (нітратного) елек-Трод типу ЕМ-ЛО3-01 шляхом індикації і вимірювання ЕРС електрода на іонометри І-130 (або Нитратомер). Іонометр призначений для вимірювання активності іонів водню (рН), одновалентних і двовалентних аніонів і катіонів (рХ), окисно-відновних потенціалів в цифровій формі і у вигляді сигналів постійного струму. Зміст нітрат-іонів можна фіксувати без попереднього вимірювання рН. На точність вимірювання не впливає присутність фосфору, білків і жирів. Не рекомендується проводити визначення в об'єктах, що містять хлорид натрію в масових концентраціях більше 3,5%.

  Вимірювання ЕРС і визначення концентрації нітратів проводять у водній витяжці, отриманої з проби продукту після попередньої екстракції при інтенсивному перемішуванні суміші з подальшим фільтруванням.

  Для дослідження розчинів з невеликими концентраціями ніт-рат-і нітрит-іонів використовують метод добавок. У 50 см3 витяжки вимірюють ЕРС, потім в неї вводять нітрат калію так, щоб масова концентрація нітрату збільшилася до значень, що відповідають попередньо побудованому калібрувальним графіком. За різницею значень розраховують шукану величину.

  Для визначення вмісту нітритів їх окислюють персульфат амонію до нітратів. Різниця між знайденим сумарним вмістом нітрат-іонів і початковою концентрацією нітрат-іонів дорівнює концентрації нітрит-іонів.

  Фотометричні методи застосовують у ряді модифікацій, каж-дая з яких має практичне значення в аналізі м'ясних продуктів і заснована на тій чи іншій хімічної реакції з утворенням специфічно забарвлених розчинів. Наприклад, застосовується метод, заснований на реакції нітриту з N-1-нафтілетілендіаміном дигідрохлориду і сульфаніламідом в фільтраті з віддаленим білком з наступним фотометрірованія або візуальним визначенням інтенсивності забарвлення. При фотоколориметричні визначенні інтенсивності забарвлення метод відповідає міжнародному стандарту і застосовується при розбіжностях в оцінці.

  Використовують також метод, заснований на реакції нітриту з реактивом Грісса (суміш розчинів сульфаниловой кислоти і а-нафтиламина в оцтової кислоти) у фільтраті з віддаленим білком з наступним виміром інтенсивності забарвлення на фотоколориметрі.

  Підготовка проб. З ковбасних виробів знімають оболонку, з фаршированих ковбас і мов в шпику - поверхневий шар шпику і оболонку, з окостів, лопаток, рулетів, корейки і грудинки - поверхневий шар шпику. Потім проби двічі подрібнюють на м'ясорубці з отворами решітки діаметром від 3 до 4 мм. Продукти, що повністю складаються з шпику з проміжними шарами м'язової тканини (шинка у формі, пресований бекон і аналогічні їм), подрібнюють повністю.

  Отриманий фарш ретельно перемішують, поміщають в скляну або пластмасову банку місткістю від 200 до 400 см3, заповнивши її повністю, закривають кришкою. Пробу зберігають при 4 ± 2 ° С до закінчення аналізу. Аналіз проводять не пізніше ніж через 24 год після відбору проб. Пробу сирих продуктів аналізують відразу після подрібнення.



  Визначення нітрат-і нітрит-іонів іонометріческіх мето-дом

  Матеріали, реактиви та обладнання. Іонометр І-130 або нітратами-мер; іоноселектівний електрод на NO3-іони; електрод порівняння - хлорсеребря-ний; ваги технічні та аналітичні; конічні колби місткістю 250 см3; хімічні склянки місткістю 50 см3; мірний циліндр місткістю 100 см3; мірна колба місткістю 1 дм3; піпетки місткістю 5 і 10 см3; нітрат калію, ч.д.а.; водний розчин сульфату цинку масовою часткою 0,45%; водний розчин суль-фата калію концентрацією (1/2 K2SO4) 1 моль/дм3; водний розчин гідроксиду натрію NaOH (0,1 моль/дм3); водний розчин персульфата амонію (NH4) S2O3 мас-совою часткою 8%.

  З метою визначення робочого діапазону концентрацій нітрат-іонів попередньо будують калібрувальний графік.

  Побудова калібрувального графіка. Наважку нітрату калію масою 10,1 г розчиняють у дистильованій воді в мірній колбі місткістю 1 дм3, доводять вміст колби водою до позначки. Отримують розчин нітрату калію молярної концентрацією 10-1 моль/дм3 (pNO3=1). Методом послідовного розбавлення з отриманого розчину готують серію стандартних розчинів нітрату калію концентрацією 10-2, 10-3, 10-4 і 10-5 моль/дм3 (pNO3 рівні відповідно 2, 3, 4 і 5).

  У п'ять хімічних склянок відбирають по 50 см3 стандартних розчинів нітрату калію, в кожну склянку додають по 1 см3 розчину сульфату калію. Зануривши електроди в склянки, в кожному розчині реєструють ЕРС елемента, складеного з нітратселектівного і хлорсеребряного електродів.
 Перед початком вимірювань електроди промивають кілька разів дистильованою водою. Вимірювання виконують, переходячи від розбавлених розчинів до концентрованих. За отриманими вимірам будують калібрувальний графік у координатах Е=? (PNO3), відкладаючи по осі ординат значення Е (мВ), по осі абсцис - відповідні значення pNO3.

  Порядок проведення аналізу. Для визначення нітрат-іонів в конічну колбу місткістю 250 см3 поміщають наважку продукту масою 10-20 г, взяту з точністю 0,01 г, додають 100 см3 дистильованої води (підігрітої до 50-60 ° С) і екстрагують протягом 30 хв при безперервному перемішуванні. Вміст колби охолоджують і фільтрують через паперовий фільтр в конічну колбу. В отриманому каламутному розчині осаджують білки. Для цього додають до фільтрату 2,5 см3 розчину гідроксиду натрію молярної концентрацією 0,1 моль/дм3 і 10 см3 розчину сульфату цинку мас-совою часткою 0,45%, нагрівають 5 хв на водяній бані при температурі кипіння, охолоджують колбу і отриманий розчин фільтрують через паперовий фільтр. Фільтрат і промивні води після промивання осаду білків на фільтрі збирають у мірну колбу місткістю 100 см3 і доводять об'єм до мітки розчином сульфату калію молярної концентрацією 1 моль/дм3. У прозорому фільтраті вимірюють ЕРС, за величиною якої на калібрувальному графіку знаходять початковий зміст нітрат-іонів в розчині.

  Для визначення нітрит-іонів їх окислюють персульфат амонію до нітратів. До 25 см3 фільтрату додають 0,5 см3 розчину персульфата амонію масовою часткою 8%, енергійно перемішують і через 5 хв вимірюють ЕРС, за величиною якої знаходять концентрацію нітрат-іонів після окислення нітрит-іонів, використовуючи калібрувальний графік. Різниця між знайденим сумарним вмістом нітрат-іонів і початковою концентрацією нітрат-іонів дорівнює концентрації нітрит-іонів, що містяться в досліджуваному розчині.

  Зміст нітрат-іонів (мг%) в м'ясі та м'ясних продуктах знаходять за формулою:







  де 62 - молярна маса еквівалента нітрат-іонів, г / моль; с - концентрація нітрат-іонів до окислення, знайдена за калібрувальним графіком, моль/дм3; 100 - обсяг фільтрату, см3; т - навішування подрібненого м'яса, м.

  Зміст нітрит-іонів (мг%) в м'ясі та м'ясних продуктах знаходять за формулою:





  де 46 - молярна маса еквівалента нітрит-іонів, г / моль; с1 - концентрація нітрат-іонів після окислення, знайдена за калібрувальним графіком, моль / дм, 100 - обсяг фільтрату, см3.



  Визначення нітритів фотометричним методом

  Матеріали, реактиви та обладнання. Мясорубка; ваги лабораторні; водяна баня; фотоелектроколориметр або спектрофотометр; фільтрувальний папір; колби мірні місткістю 100, 200 і 1000 см3; піпетки мірні; калію гексаціаноферрат; ацетат свинцю; крижана оцтова кислота; тетраборат натрію Na2B4O7? 10Н2О; нітрит натрію; розчини для осадження білків: реактив Карреза I, реактив Карреза II, насичений розчин бури; розчини для проведення кольорової реакції: розчин I, розчин II, розчин III, основний, робочий і стандартні розчини нітриту натрію для побудови калібрувального графіка.

  Приготування реактивів. Реактив Карреза I: 106 г гексаціаноферрата калію розчиняють в дистильованої воді і доводять об'єм розчину до 1000 см3. Реактив зберігають у склянці з темного скла не більше місяця.

  Реактив Карреза II: 220 г ацетату цинку і 30 см3 крижаної оцтової кислоти розчиняють в дистильованої воді і доводять об'єм розчину до 1000 см3. Реактив зберігають не більше місяця.

  Насичений розчин бури: 50 г тетраборату натрію розчиняють в 1000 см3 теплої дистильованої води і охолоджують до 20 ± 2 ° С.

  Розчини для проведення кольорової реакції.

  Розчин I. Розчиняють, підігріваючи на водяній бані, 2 г аміно-бензолу суль-фаміда NH2C6H4SO2NH2 в 800 см3 води. Охолоджують, при необхідності фільтру-ють і додають, помішуючи, 100 см3 концентрованої соляної кислоти (Р20 1,19 г/см3), потім доливають водою до 1000 см3.

  Розчин II. Розчиняють у воді 0,25 г N-1-нафтілетілендіаміна дигідрохлориду C10H7NHCH2CH2NH2? 2НСl, доливають водою до 250 см3. Отриманий розчин зберігають у холодильнику, в добре закупореній пляшці з коричневого скла не більше тижня.

  Розчин III. Розбавляють 445 см3 концентрованої соляної кислоти (Р20 1,19 г/см3) водою до 1000 см3.



  Порядок проведення аналізу. Зразок для аналізу поміщають в конічну колбу місткістю 300 см3. Для звільнення від білків додають послідовно 5 см3 насиченого розчину тетраборату натрію (бури) і 100 см3 води при температурі не нижче 70 ° С.

  Нагрівають колбу на киплячій бані протягом 15 хв, періодично струшуючи.

  Дають колбі з вмістом охолонути до кімнатної температури і додають послідовно 2 см3 реактиву Карреза I і 2 см3 реактиву Карреза II, ретельно перемішуючи після кожного додавання.

  Переливають вміст у мірну колбу місткістю 200 см3, доливають водою до мітки і перемішують. Вміст колби витримують протягом 30 хв при кімнатній температурі.

  Обережно зливають верхній шар рідини і фільтрують його через гофровану фільтрувальний папір, отримуючи прозорий розчин.

  Піпеткою переносять частину фільтрату об'ємом не більше 25 см3 в мірну колбу місткістю 100 см3 і доливають водою до 60 см3.

  Додають 10 см3 розчину I для кольорової реакції, потім 6 см3 розчину III для кольорової реакції, перемішують і залишають на 5 хв у темряві при кімнатній температурі.

  Додають 2 см3 розчину II для кольорової реакції, перемішують і залишають на 3-10 хв у темряві при кімнатній температурі. Потім розбавляють водою до мітки.

  Вимірюють показник спектрального поглинання розчину на фотоелектроколориметр або спектрофотометрі при довжині хвилі близько 538 нм.



  Побудова калібрувального графіка. Для приготування основного розчину нітриту натрію зважують наважку реактиву, що містить точно 1 г нітриту натрію, розчиняють у воді, кількісно переносять у мірну колбу місткістю 500 см3, доводять водою до мітки і перемішують.

  Масу наважки (г) для хімічно чистого реактиву з масовою до-лей основної речовини 99% обчислюють за формулою







  Для приготування робочого розчину 5 см3 основного розчину переносять в мірну колбу місткістю 1000 см3, доводять водою до мітки і перемішують. З отриманого робочого розчину готують серію стандартних розчинів: 5, 10 і 20 см3 робочого розчину піпеткою вносять у три мірні колби місткістю 100 см3, доводять водою до мітки і перемішують.

  Отримані стандартні розчини містять в 1 см3 відповідно 2,5; 5,0 і 10,0 мкг нітриту натрію

  Готують три серії стандартних розчинів, починаючи щоразу з приготування основного розчину з нової навішування нітриту натрію. Робітник і стандартні розчини нітриту натрію нестійкі, тому їх готують безпосередньо перед побудовою калібрувального графіка.

  Для побудови калібрувального графіка в чотири мірні колби місткістю 100 см3 піпеткою вносять: у першу колбу для приготов-лення контрольного розчину 10 см3 води, а в інші по 10 см3 стандартних розчинів, що містять 2,5; 5,0 і 10,0 мкг нітриту натрію в 1 см3 розчину.

  У кожну колбу додають по 50 см3 води, по 10 см3 розчину I і по 6 см3 розчину III для проведення кольорової реакції. Розчини в колбах перемішують і витримують у темному місці протягом 5 хв. Додають 2 см3 розчину II для проведення кольорової реакції, перемішують і витримують 3-10 хв у темному місці при 20 ± 2 ° С.

  Розчини в колбах доводять водою до мітки і перемішують. Вимірюють інтенсивність червоного забарвлення на спектрофотометрі при?=538 нм або фотоелектроколориметри із зеленим світлофільтром в кюветі з товщиною поглинаючого світло шару 1 см відносно контрольного розчину.

  За отриманими середніми даними з трьох стандартних розчинів на міліметровому папері розміром 25? 25 см будують калібрувальний графік. На осі абсцис відкладають концентрацію нітриту натрію (мкг в 1 см3 забарвленого розчину); на осі ординат - відповідну оптичну щільність. Калібрувальний графік повинен проходити через початок координат.

  Якщо отримана оптична щільність перевищує максимальну оптичну щільність на калібрувальному графіку, то кольорову реакцію проводять з меншим об'ємом фільтрату.

  Зміст нітритів (мг / кг) в перерахунку на нітрит-іон обчислюють за формулою:







  де з-концентрація нітриту натрію, знайдена за калібрувальним графіком, мкг/см3, V1 - загальний обсяг екстракту, см3, V2 - обсяг колоріметріруе-мого розчину, см3, т - маса наважки зразка для аналізу, г; V3 - обсяг фільтрату, взятий для про-ведення кольорової реакції, см3.



  Також існує метод визначення нітриту натрію з реакції Грісса і метод визначення нітратів по реакції з n-1-нафтілетілен-діаміном дигідрохлориду. 
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
 Інформація, релевантна "Визначення фенолів, бенз (а) пірену, нітратів і нітритів в м'ясних продуктах "
  1.  Контрольні питання
      визначення загальної кількості мікроорганізмів. 5. Що називається гранично допустимою концентрацією? 6. Що відноситься до мікробних контамінанти? 7. Яким методом визначають антибіотики в м'ясі та м'ясних продук-тах? 8. У які терміни перед забоєм припиняють дачу антибіотиків? 9. Перерахуйте методи визначення гормонів. 10. Що таке мікроскопічні гриби і їх метаболіти?
  2.  Отруєння хімічними сполуками, що утворюються при зберіганні, переробці та приготуванні харчових продуктів
      визначення умов зберігання, обробки і приготування, які зводять до мінімуму або виключають утворення будь-яких небезпечних для здоров'я людини
  3.  Джерела забруднення грунту, їх гігієнічна характеристика
      визначенням експертів ВООЗ, називають хімічні речовини, біологічні організми (бактерії, віруси, найпростіші, гельмінти) і продукти їх життєдіяльності, які зустрічаються в неналежному місці, в неналежне час і в неналежному кількості. Під забрудненням грунту слід розуміти лише те зміст хімічних і біологічних забруднювачів у ній, яке стає небезпечним для здоров'я при
  4. И
      визначення видової або типовий приналежності мікроорганізму на підставі вивчення культурально-морфологічних, біохімічних, серологічних і патогенних властивостей. Культуральні властивості мікроорганізмів визначають посівом їх на рідкі, напіврідкі і щільні середовища. На рідких середовищах враховують ступінь і характер помутніння бульйону, величину, форму і консистенцію осаду, наявність або відсутність
  5. К
      визначений ветеринарним статутом Союзу РСР. Зміна переліку хвороб виробляє МСХ СРСР. Див також Карантин і літ. при цій статті. + + + Карбамати, група пестицидів; похідні карбамінової кислоти. У порівнянні з хлорорганическими сполуками К. мало стійкі в зовнішньому середовищі і не накопичуються в грунті, воді, рослинах, що при досить високій пестицидного активності обумовлює їх
  6. О
      визначення виду збудника інфекції або встановлення діагнозу хвороби тварин, при якій не передбачається режим карантину. При цьому карантин замінюється О. лише після проведення дезінфекції або самообеззаражіванія об'єктів зовнішнього середовища та ветеринарної обробки тварин. За умовами режиму О. максимально обмежують в'їзд, виїзд і транзитний проїзд усіх видів транспорту, введення (ввезення),
  7. П
      визначення їх концентрації), а також мікологічні дослідження кормів. Профілактика полягає в оберігання кормів від розвитку в них токсигенних грибів, тобто у своєчасному висушуванні кормів до необхідних кондицій, а також в їх консервуванні різними фунгістатичність речовинами. + + + Пеніцили, кістевікі, численна, що налічує близько 900 видів, група
  8. С
      визначенні сторонніх запахів в атмосферному повітрі, при оцінці якості питної води і харчових продуктів. Фізичні методи застосовують при визначенні деяких фізичних показників об'єктів - температури, вологості, руху, тиску повітря, ультрафіолетового випромінювання і іонізації повітря, радіоактивності різних речовин, теплопровідності тканин одягу та ін, використовуючи при цьому
  9. Т
      визначенню забруднення отруйними речовинами кормів і продуктів тваринного походження. Т. а. включає різні методи дослідження. Біологічні методи використовують для визначення патогенних грибів або токсинів і отруйних рослин, а також для виявлення залишків токсичних речовин в об'єктах ветеринарного нагляду. Біохімічні методи застосовують у ветеринарії головним чином для
  10.  ВЕТЕРИНАРНО-САНІТАРНА ЕКСПЕРТИЗА ПРИ КОНТАМІНАЦІЇ техногенно забруднювачами
      бензол та ін.) У воді сполуки ртуті піддаються біотрансформації в бактеріях, зоопланктоні з поступовим їх накопиченням в організмі риб і морських тварин у вигляді метилртути, надзвичайно токсичної, діючої на цен-центральну нервову систему, нирки, печінку та інші органи травлення. У продуктах підвищений вміст ртуті найбільш часто буває в результаті згодовування тваринам рибної
© medbib.in.ua - Медична Бібліотека