загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня Наступна »

Мікроскопічне дослідження на бліду трепонем

У хворих з підозрою на сифіліс дослідженню на бліду трепонем підлягають усі висипання, особ але ерозивні та виразкові на шкірі і слизових оболонках порожнини рота, статевих органів і заднього проходу. Якщо ис проходження елементів, що висипали неможливо або за важкі, то вдаються до пункції лімфатичних вузлів.

Бліда трепонема розташовується в тканинних щілинах, між волокнами сполучної тканини, навколо лімфатичних і кровоносних судин, в стінках і навіть про светах лімфатичних капілярів. Матеріалом, який необхідний для бактеріологічного дослідження на бліду трепонем, є тканинна рідина (се рум). Для отримання тканинної рідини з елементів, що висипали сифілісу існує кілька методів.

Перед взяттям матеріалу для дослідження поверхню ерозивних або виразкових елементів попередньо обережно очищають ватяним або марлевим тампоном, змоченим у фізіологічному розчині хлориду натрію, після чого осушують, не допускаючи травмування під хаті жание кровотечі.

Через деякий час на поверхні досліджуваного елемента починає виділятися досить рясна ткане вая рідину. Якщо цього не відбувається, то можна осто рожно погладжувати поверхню ерозії або виразки бактеріологічною петлею або металевою лопаткою. Тканинну рідину для дослідження можна отримати також шляхом здавлювання (масажу) пальцями в резино вої рукавичці підозрілої ерозії або виразки, а також шляхом створення відносного вакууму за допомогою бі ровськ баночки. За відсутності ерозії або із 'язвленія висипань матеріал для дослідження можна отримати шляхом скарификации їх поверхні скальпа лем. Якщо проводилося місцеве лікування або трепонема не знайдено, то слід призначити хворому на кілька днів влажновисихающіе пов'язки з ізотонічного розчину хлориду натрію і потім проводити повторне дослідження.

Пункцію лімфатичного вузла здійснюють у хворого в положенні лежачи з дотриманням всіх правил АСЕП тики. Для пункції використовують гостру голку з тупо сре занним кінцем і шприц з добре притертими поршнем. Голка і шприц повинні бути сухими. Досліджуваний лим фатіческій вузол фіксують I і II пальцями лівої руки, а правою з шприцом і одягненою на нього голкою роблять по шаровий прокол шкіри і лімфатичного вузла. Прокол роблять по довгій осі вузла, просувають голку до кінця вузла, злегка масажуючи його. Потім повільно висувають голку назад, одночасно відсисаючи шприцом місти моє лімфатичного вузла. При так званої «пункції із збагаченням» рекомендується ввести в корковий шар лімфатичного вузла 0,1-0,2 мл стерильного изотоничен ського розчину хлориду натрію, рухом поршня шприца промассіровать вузол і потім відсмоктати місти моє. Пунктат лімфатичного вузла використовують для ис проходження на бліду трепонем за звичайною методикою, причому перед дослідженням його бажано не сміши вать на предметному склі з фізіологічним розчином хлориду натрію.

Найкращим методом виявлення блідих трепонем для діагностики сифілісу є мікроскопічне дослідження нативних (природних, вологих) препа ратів в темному полі. Дослідження в темному полі основа але на феномені Тиндаля: якщо в темне приміщення про пустити через вузьку щілину сонячне світло, то починають яскраво світитися дрібні пилинки, невидимі при зви ном освітленні. Це відбувається тому, що знаходяться в повітрі пилинки відображають сонячні промені в різних напрямках і частина цих променів потрапляє в наше око. При мікроскопічному дослідженні в темному полі іс користується спеціальний конденсор, направляючий промені світла від освітлювача під дуже малим кутом до площини столика мікроскопа, внаслідок чого світло не потрапляє в окуляр мікроскопа, і поле зору є темним. Іс следуемая об'єкт відображає світло і стає чітко ві дімим на темному тлі. Дослідження в темному полі мікроскопа дозволяє вивчати бліду трепонем в жи вом вигляді, а також диференціювати її від інших Трепов нього як за морфологічними ознаками, так і за характе терни особливостям руху.
трусы женские хлопок


Для отримання затемненого поля зору при відсутності спеціального конденсора можна користуватися спосо бом М. П. Архангельського. Для цього між двома лінза ми конденсора Аббе на нижню лінзу накладають гурток з щільного чорного паперу з таким розрахунком, що б по краю лінзи залишався просвіт в 2-3 мм. Для того, щоб гурток не зміщувати, по його краю залишають при вирізання чотири виступи такої довжини, щоб вони упи ралісь в металеву оправу лінзи.

Приготування препарату для дослідження в затемненому полі зору проводиться таким чином. Краплю серозного ексудату, отриманого з поверхні досліджуваного елемента, поміщають в центрі тонкого пред метного скла, попередньо знежиреного сумішшю рівних частин спирту і ефіру. Для дослідження в темному полі предметні скла повинні бути не товще

1,1-1,2 мм, без подряпин, абсолютно чистими. Крапля з досліджуваним матеріалом не повинна виходити за МЕЖАХ ли покривного скла. Поруч з краплею серозного екссуда та наносять рівну за величиною краплю ізотонічного розчину хлориду натрію; швидко змішавши обидві краплі, по кривают їх покривним склом.

У деяких лабораторіях, однак, з успіхом микроскопируют тільки серозний ексудат без додавання з тонічного розчину. На верхню лінзу темнопольного конденсора наносять краплю иммерсионного масла або дистильованої води, до якої притискають приго товления препарат. Мікроскопію проводять з об'єктами вом 40 і окуляром 10 або 5.

Джерело світла встановлюють так, щоб світловий промінь падав на дзеркало мікроскопа.

Після того як препарат поміщений на столик микроско па і встановлено джерело світла, тубус мікроскопа з об'єк єктів під контролем очі обережно опускають майже до покривного скла. Потім поворотами дзеркала домагаючись ються найбільш яскравого освітлення поля зору і після цього, не відриваючи очі від окуляра, дуже обережно під нимают тубус мікроскопа до тих пір, поки не з'явиться темне поле з світяться в ньому твердими частинками, що знаходяться в броунівському русі. Серед них мо жуть виявлятися окремі нейтрофіли, лімфоцити, епітеліальні клітини. Якщо препарат сильно забруднений цими елементами, то краще приготувати новий препа рат. Бліда трепонема в темному полі зору представ ляется у вигляді ніжної спіралі або тонкого ніжного пунк тиру. Вона слабо переломлює світло і має сріблястий відтінок. Важливе значення має оцінка характерних для блідої трепонеми рухів. При мікроскопії НЕ сле дме змішувати з трепонемою нитки фібрину - довгі

(з великими завитками) освіти, що виробляють враження рухомих за рахунок струму рідини. Переважно вони дуже тонкі і нерівномірні по товщині.

Бліду трепонему слід диференціювати від інших трепонем, насамперед зустрічаються на поло вих органах і в порожнині рота. На статевих органах не обхідно мати на увазі T. refringens. Вона значно товщі блідої трепонеми, сильніше переломлює світло, має не численні нерівномірні, грубі, широкі, більш похилі і менш глибокі завитки. Кінці її загострені, руху різкі, безладні. Також слід отли чать від блідої трепонеми T. balanitidis, схожу на T. refringens, що відрізняється значною довжиною, тол щіной і має 6-10 завитків.

При дослідженні матеріалу, взятого з порожнини рота, необхідно враховувати наявність тут наступних трепонем:



1) T. microdentium (T. denticola) - вона коротше і, як правило, товще блідої трепонеми, завитки її не стільки загострені, вуглуваті, вона сильніша прілому ляє світло, виглядає яскравіше, переміщається повільніше, згинальні руху рідкісні;

2) T. buccalis володіє 3-10 широкими, плоскими, що не рівномірними завитками, сильно заломлює світло, жваво рухається, кінці її тупі;

3) T. vincenti (з фузоспіріллезного симбіозу) перед ставлять собою тонку і ніжну трепонему із пло ськими і нерівномірними завитками, іноді маю щую 2-3 пологих завитка; руху її активні, але безладні, вона світиться яскравіше блідих трепонем ми.




Бліді трепонеми погано фарбуються аніліно вимі барвниками, але відновлюють нітрат срібла в металеве срібло, яке відкладається на поверхні трепонем і робить їх видимими при мікро скопії. На цьому феномені засновано виявлення блед них трепонем в тканинах.

Метод Levaditi і Manouelian. Шматочки шкіри або інших органів, товщиною 1-2 мм фіксують у 10% форма лине протягом 24-48 год, промиваються 96% етанолом в ті чення 12-16 год, потім промивають дистильованою водою до занурення шматочків на дно посудини. Після цього проводиться імпрегнація 1% розчином нітрату срібла з

10% розчином піридину. Шматочки витримують в цій суміші (у темній банці з притертою пробкою) 2-3 год при кімнатній температурі, а потім 4-6 год при температурі

50 ° С в термостаті. Потім препарати швидко промивають у 10% розчині піридину, після чого протягом кількох годин проводиться відновлення срібла 4% піррогало виття кислотою з додаванням 10% очищеного ацетону і

15% розчину піридину.

Метод Морозова - один з найбільш швидких мето дов сріблення блідих трепонем, що дають цілком удов летворітельние результати [Овчинников Н.М. та ін,

1987]. Для фарбування за методом Морозова необхідні наступні реактиви:



- реактив № 1 - 1 мл крижаної оцтової кислоти, 2 мл 40% розчину формаліну і 100 мл дистильованої води;

- реактив № 2 - 5 г таніну, 100 мл рідкої карболової кислоти і 100 мл дистильованої води;

- реактив № 3 - розчин нітрату срібла (в 100 мл дис тіллірованной води розчиняють 5 г кристалічного нітрату срібла ; з цієї кількості в окрему посудину відливають 20 мл; до решти 80 мл розчину нітрату се ребра по краплях додають міцний водний розчин аміаку, поки що утворюється жовто коричневий, а за тим буро чорний осад не розчиниться і не залишиться лише легка опалесценція; якщо додавання аміаку вчасно не припинено, то з решти 20 мл розчи ра нітрату срібла доливають по краплях цей розчин до появи легкої опалесценции), для фарбування реак тив розбавляють дистильованою водою 1:10.

Імпрегнація. Тонкий препарат висушують на повітрі, але краще в термостаті. На 1 хв наливають на препарат реактив

№ 1, потім рідину зливають, препарат обмивають водою. Протруюють реактивом № 2 при підігріванні до появле ня парів (1 хв). Ретельно промивають водою, наливають реактив № 3, злегка підігрівають протягом 1-2 хв, поки ре актив не стане темно коричневим. Препарат знову тщатель але промивають водою і висушують. Мікроскопують з ним мерсіонной системою.



При цьому методі імпрегнації трепонеми коричневі або майже чорні, у них зберігаються морфологічні особливості.

Препарати не підлягають тривалому зберіганню.

Забарвлення за Романовським - Гімзою. Фіксацію мазка здійснюють у суміші Никифорова (етанол і ефір в рав них обсягах). Після випаровування з мазка фіксує рідини виробляють забарвлення препарату фарбою Рома новского - Гімзи, розведеною з розрахунку 2 краплі фарби на 1 мл дистильованої води. Для цього 10-15 мл раз веденной фарби наливають у чашку Петрі, на дві стек лянние палички мазком вниз опускають предметне стек ло і залишають препарат для фарбування на 2-5 год, залежно від інтенсивності фарбувальний спосіб ності розчину. Після закінчення фарбування предмет ве скло з мазком обережно промивають бічній струменем води. Висушують препарат при кімнатній температурі ре. Мікроскопічне дослідження проводять в Іммерів Сіон системі. При фарбуванні препаратів за методом Ро мановскіх - Гімзи бліда трепонема набуває рожевого або рожево фіолетовий колір, в той час як інші трепонеми забарвлюються в інтенсивно синява ті тони.
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна " мікроскопічне дослідження на бліду трепонем "
  1. ІНТЕРПРЕТАЦІЯ ШКІРНИХ ЗМІН
    Томас Б. Фітцпатрік, Харлей Л. Хейнес (Thomas В. Fitzpatrick, Harley A. Haynes) Клінічне дослідження шкіри Ідентифікація шкірних ушкоджень, або змін, являє собою проблему, подібну до такої при розпізнаванні клітин в мазку крові: найдрібніші деталі мають величезне значення. На пошкодження шкіри може скаржитися сам хворий або вони можуть бути виявлені випадково при
  2. ДІАГНОСТИКА ІНФЕКЦІЙНИХ ХВОРОБ
    Джеймс Дж. Плорд (James f. Plorde) Для діагностики інфекційної хвороби вимагається пряме чи непряме виявлення патогенного мікроорганізму в тканинах ураженого макроорганізму. У цьому розділі описані основні методи, за допомогою яких це досягається. Пряме мікроскопічне дослідження. Пряме мікроскопічне дослідження тканинних рідин, ексудатів і тканин є одночасно
  3. СИФІЛІС
    Кінг К. Холмс, Шейла А. Люкхарт (King К. Holmes, Shella A. Lukehart) Визначення. Сифіліс - хронічна системна інфекція, що викликається Treponema pallidum підвид pallidum. Передається статевим шляхом, інкубаційний період у середньому триває близько 3 тижнів і супроводжується розвитком первинного вогнища ураження, пов'язаного з регіонарним лімфаденітом. Вторинна бактеріеміческого стадія пов'язана з
  4. СИФІЛІС. ПЕРВИННИЙ ПЕРІОД СИФІЛІСУ
    В даний час існує велика група інфекцій, що передаються статевим шляхом (ІПСШ). Класифікація ІПСШ (ВООЗ, 1982) Бактеріальної природи 1. Сифіліс та інші трепонематози (пінта, фрамбезія, беджель) 2. Гонорея 3. М'який шанкр 4. Венеричний лімфогранулематоз 5. Донованоз 6. Урогенітальний хламідіоз і хвороба Рейтера 7. Урогенітальний мікоплазмоз (у т.ч.
  5.  Первинний період сифілісу
      Первинний період сифілісу починається з моменту появи твердого шанкра або первинної сіфіломи. Він триває 6-8 тижнів. Спочатку на місці впровадження в організм блідою трепонеми з'являється невелика червонувата пляма або папула. Протягом декількох днів цей елемент збільшується до розміру горошини, одночасно в його підставі виявляється щільний склеротичний інфільтрат (первинний
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...