загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня Наступна »

Методи виявлення і дослідження найпростіших

пироплазмидо

Для виявлення пироплазмидо досліджують мазки крові від тварин, хворих або підозрюваних у захворюванні. У разі загибелі або вимушеного забою хворих тварин мазки можна готувати з вмісту судин мозку, селезінки, печінки, нирок, легенів і уражених лімфатичних вузлів. Мазки готують тільки з органів свіжих трупів, так як в них паразити швидко лізуються, особливо при високій температурі навколишнього середовища. У необхідних випадках вживають заходів для виключення інфекційних хвороб.

Використовують добре знежирені скла. Кров для дослідження краще всього брати з периферичних судин вушної раковини. Місце взяття готують шляхом вистригання волосяного покриву, потім проводять дезінфекцію і знежирення етиловим спиртом, спиртом-ефіром. Ін'єкцію проводять голкою або підрізають ножицями кінчик вуха.

Краплю крові в діаметрі не більше 2-3 мм, виступаючу на місці проколу, наносять на край знежиреного предметного скла і роблять мазок. Дуже важливо мазок підготувати з першої краплі крові, тому що в ній значно більше уражених пироплазмидо еритроцитів. Наступний мазок необхідно готувати зі свіжої краплі крові після видалення згустку з місця ін'єкції.

Виготовлення мазків необхідно проводити в період підвищення температури тіла тварин і появи перших клінічних ознак, до введення специфічних препаратів. Мазки просушують на повітрі 10-20 хв, уникаючи дії прямих сонячних променів і обмежуючи доступ мух. Потім їх підписують голкою або простим олівцем, вказуючи вид та номер тварини, дату і місце взяття.

Для фіксації використовують метиловий спирт, яким заливають мазки крові на 3-5 хв, після цього скла виймають і висушують 15-20 хв.

Можна фіксувати сумішшю рівних частин абсолютного етилового спирту і ефіру або тільки етиловим спиртом 15-20 хв.

Добре підготовлений мазок повинен бути рівномірним і тонким. У товстих мазках еритроцити і знаходяться в них паразити виявляються насилу.

Забарвлення можна виробляти за Романовським-Гімзою. Для приготування робочого розчину фарби на 1 мл дистильованої води додають 1-3 краплі основного розчину фарби. Робочий розчин краще всього подслаівать під скло з мазком. У цих випадках на мазку не залишається мікрочастинок нерастворившихся фарби, що полегшує при мікроскопії пошук кільцеподібних форм пироплазмидо та диференційну діагностику. Тривалість прокрашивания мазків складає 30-40 хв. Після закінчення цього терміну фарбу змивають, мазок промивають дистильованою водою, висушують і досліджують з використанням мікроскопа. Якість фарбування залежить від рН середовища (оптимальним середовищем є 6,8-7,0). Правильно забарвлені мазки мають рожевий колір з фіолетовим відтінком. Еритроцити забарвлюються в рожевий колір, протоплазма лімфоцитів - в синій, їх ядра - в темно-фіолетовий, протоплазма паразитів - в блакитний, шматочки хроматину - в темно-червоний або червоний колір.

Досліджують мазки під мікроскопом з імерсійною системою.



Діагностика еймеріозов і ізоспороз

Для виявлення наявності ооцист еймерій і ізоспор з фекалій, вмісту кишечника та іншого матеріалу використовується кілька методів.

Метод нативного мазка найбільш простий і легко здійсненний в будь-яких умовах, що не вимагає спеціальної апаратури та реактивів для виявлення ооцист.

На чисте предметне скло піпеткою наносять 2-4 краплі чистої води (дистильованої, водопровідної), до них додають невелику кількість фекалій і перемішують. Мазок накривають покривним склом і досліджують під малим (х 8,10) і середнім (х 40) об'єктивом. Замість фекалій можна досліджувати таким же чином зскрібки оболонок кишечника.

При невеликому ступені зараження ооцист виявити таким методом важко, проте при високому зараженні він дає можливість порівняно достовірно визначити інтенсивність інвазії.

Більш точні результати одержують при використанні різних розчинів, що мають велику питому вагу.
трусы женские хлопок
У таких розчинах ооцисти через деякий час спливають на поверхню.

Найбільш поширеними флотаційні методи є наступні: методи Фюллеборна, Дарлінга, Щербовіча, Котельникова і Хренова та ін (див. Гельмінтоовоскопія).

Дослідження еймеріід в уражених органах. Для дослідження на наявність еймеріід у тварин відбирають шматочки тонкого і товстого кишечника, у кроликів, крім того, печінка, у гусей також нирки. Матеріал поміщають у фіксуючу рідину - 10%-ний розчин формаліну або 96%-ний етиловий спирт. Краще всього використовувати нейтральний формалін, для приготування якого використовують порошок вуглекислого кальцію (крейда), 10% його додають до обсягу формаліну і дають відстоятися 5-6 днів, потім зберігають з осадом.

Фіксацію матеріалу краще проводити в скляному посуді. У зимовий час в якості фіксує рідини краще використовувати етиловий спирт. Її, незалежно від пори року, рекомендується через добу замінювати. Якщо в одну банку поміщають шматочки органів від різних тварин, їх рекомендується загорнути в марлеві мішечки. Всередину банки з фіксуючим матеріалом поміщають паперову етикетку, на якій графітним олівцем вказують вид тварини, його номер і дату взяття матеріалу.

Приготовлені гістологічні зрізи найкраще фарбувати гематоксилін-еозином.

При необхідності збереження ооцист еймеріід на тривалий час використовують 5%-ний розчин формаліну, 0,1%-ний розчин калію двухромовокислого, рідина Барбагалло (3%-ний розчин формаліну на фізіологічному розчині натрію хлориду) .



Токсоплазми

Для виділення токсоплазм використовують органи полеглих тварин: головний мозок, лімфатичні вузли, печінку, селезінку, легені, плаценту та органи абортовану плода. Спочатку готують мазки-відбитки з уражених органів, які фіксують метиловим спиртом (етиловим) і забарвлюють за Романовським-Гімзою. Відбір органів і приготування мазків виробляють не пізніше 2-3 годин після забою або падежу тварин. Зазначеним способом виділити токсоплазм вдається не завжди.

Більш ефективним способом є постановка біопроби на білих мишах.

Для цього відібраний матеріал з внутрішніх органів розтирають з невеликою кількістю ізотонічного розчину натрію хлориду і отриману суспензію вводять 3-5 білим мишам внутрішньоочеревинно по 0,5 мл. У позитивних випадках на 5-7 день розвивається хвороба, при якій в черевній порожнині накопичується ексудат, який містить велику кількість токсоплазм. При негативній біопробі, а також для накопичення токсоплазм можна проводити 3-5 «сліпих пасажів» шляхом введення суспензії головного мозку мишам від заражених раніше білих мишей нової партії мишам.

Методичними вказівками з лабораторних досліджень на токсоплазмоз тварин, затвердженими 21.01.84, рекомендується для збагачення матеріалу цистами застосовувати метод штучного перетравлення в шлунковому соку. Патматеріал (лімфовузли, довгастий мозок абортовану плоду) подрібнюють, 50 г фаршу поміщають в колбу ємністю 1 літр і заливають 10 об'ємами штучного шлункового соку. Колбу поміщають у термостат при температурі 37 ° С на 1,5 години. Отриману масу фільтрують через марлю, потім фільтрат центрифугируют при 2 тис. об. / Хв. протягом 15 хвилин. Після видалення надосадової рідини осад ресуспензіруют в подвійному обсязі ізотонічного розчину з додаванням антибіотиків (пеніцилін, стрептоміцин по 1 тис. ОД на 1 л суспензії). Суспензію в дозі 0,3 мл вводять внутрішньочеревно 3-5 білим мишам.

Для виявлення токсоплазм готують мазки із вмісту черевної порожнини або мазки-відбитки з головного мозку, фіксують, потім фарбують за Романовським-Гімзою.

Наявність збудника в організмі тварин може бути підтверджено шляхом використання РСК (РДСК), яку ставлять відповідно до «Тимчасовим настановою щодо застосування токсоплазмозного антигену Каз.НІВІ та інституту зоології АН Каз.ССР в реакції зв'язування комплементу РСК (РДСК) для серологічної діагностики токсоплазмозу і токсоплазмоносітельства у тварин ».




Саркоцистами

Для виявлення саркоцист досліджують у овець шийну частину стравоходу, скелетні м'язи. Знаходять макроцисти завбільшки з просяне зерно і більше.

У свиней їх можна виявити в м'язах діафрагми, міжреберних і ін саркоцистами звільняють від навколишньої тканини, на предметному склі руйнують в 2-3 краплях ізотонічного розчину натрію хлориду, потім краплю суспензії микроскопируют при середньому збільшенні мікроскопа з опущеним конденсором. У позитивних випадках виявляють банановідние (серповидні) мерозоїти.

Видимість мікроцисти виробляють шляхом дослідження зрізів завбільшки з вівсяне зерно з м'язів стравоходу, діафрагми, серця, скелета. Зрізи досліджують у роздавленому в компресор вигляді під малим збільшенням мікроскопа. Їх можна фарбувати за Романовським-Гімзою, генціанвіолетом, метиленової синню та ін

саркоцистами можна також виявити і при гістологічному дослідженні уражених тканин. Відібрані шматочки тканини фіксують у 10% розчині нейтрального формаліну. Гістосрези готують загальноприйнятими методами, а фарбують гематоксилін-еозином.



Тріхомонади

Виділення трихомонад виробляють шляхом мікроскопічного і культурального дослідження патологічного матеріалу (витікання і змиви з статевих органів, навколоплідної рідини, зскрібки з плаценти, вміст сичуга абортовану плода, секрет придаткових статевих залоз, сперми).

Для виявлення рухомих трихомонад наносять на предметне скло патологічний матеріал у вигляді товстого мазка або роблять розчавлену краплю і микроскопируют спочатку під малим, потім середнім збільшенням мікроскопа при затіненому полі зору мікроскопа. Мазок можна фарбувати за Романовським-Гімзою з попередньою фіксацією в метиловий спирт.

Посіви досліджуваного матеріалу виробляють на спеціальні живильні середовища (середа Петровського) в кількості 0,3-0,5 мл з осаду проби. Матеріал поміщають в термостат при 370С і досліджують на 3, 5, 7 і 10 день. Вже через 24-46 годин може спостерігатися зростання трихомонад.

Вищевказані методи використовуються для виділення трихомонад при ураженні статевих органів у великої рогатої худоби.

У свиней, птахів трихомонади мешкають в кишечнику і деяких інших органах. Для виділення паразитів використовують зскрібки з уражених органів і досліджують нативним мазком.

Є дані про те, що і ці трихомонади добре ростуть на штучних поживних середовищах.



Балантидії

Виділення балантидій виробляють шляхом дослідження свежевиделенних фекалій або взятих з прямої кишки тварини. Матеріал необхідно піддати дослідженню не пізніше 2-3 годин після його взяття. Трупи свиней на наявність балантидій досліджують протягом 5-6 годин після смерті тварини. У більш пізні терміни балантидій виявити не вдається у зв'язку з їх лізисом. За деякими даними (А. І. Федоров, 1980) трупи слід піддавати дослідженню на виявлення балантидій протягом 1,5-2 годин після забою або загибелі поросят.

Мікроскопічне дослідження фекалій найкраще провести безпосередньо на фермі, використовуючи метод нативного мазка. Для цього беруть невелику кількість фекалій, поміщають на предметне скло і рівномірно перемішують з рівною кількістю теплого ізотонічного розчину натрію хлориду або дистильованої води (температура не більше 37,0 ° С), накривають покривним склом і переглядають мазок під малим збільшенням мікроскопа. У позитивних випадках виявляють вегетативні форми і цисти балантидій. Під мікроскопом чітко видно великі, швидко пересуваються за допомогою вій паразити.

При необхідності гістологічного дослідження відбирають шматочки стінок товстого і тонкого кишечника, шлунка, лімфовузлів, паренхіматозних органів і фіксують у 10% розчині формаліну. Гістосрези забарвлюють гематоксиліном-еозином.
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна " Методи виявлення і дослідження найпростіших "
  1. екзогенного алергічного альвеоліту
    Екзогенні алергічні альвеоліти (син.: гіперчутливий пневмоніт, інтерстиціальний гранулематозний альвеоліт) - група захворювань, що викликаються інтенсивної і, рідше , тривалої ингаляцией антигенів органічних і неорганічних пилів і характеризуються дифузним, на відміну від легеневих еозинофіли, ураженням альвеолярних і інтерстиціальних структур легенів. Виникнення цієї групи
  2. деформуючого остеоартрозу. ПОДАГРА.
    Деформуючого остеоартрозу (ДОА). У 1911 році в Лондоні на Міжнародному конгресі лікарів всі захворювання суглобів були розділені на дві групи: первинно-запальні та первинно-дегенеративні. Ревматоїдний артрит і хвороба Бехтерева відносяться до першої групи. Представником другої групи є деформуючого остеоартрозу (ДОА), що представляє собою: дегенеративно-дистрофічних захворювань
  3. ЛІКУВАННЯ
    Лікування гіпертонічної хвороби становить серйозну проблему, ще дуже далеку до свого вирішення. У міру розвитку медичної науки, постійно змінюються підходи до терапії цього стану, кінцеві цілі лікування, створюються нові прогресивні революційні лікарські засоби з надзвичайно складними механізмами корекції АТ. У багатьох країнах світу були прийняті федеральні
  4.  ХРОНІЧНИЙ ПІЄЛОНЕФРИТ
      У більшості випадків хронічний пієлонефрит є наслідком неизлеченного гострого і може виявлятися різноманітною клінікою. У одних хворих він протікає латентно, супроводжується лише помірним болем і лейкоцитурією. У інших же пацієнтів захворювання періодично загострюється, і процес поширюється на нові ділянки паренхіми нирки, викликаючи склероз не тільки канальців, але і клубочків.
  5.  Хронічному бронхіті. Хронічним легеневим серцем.
      За останні роки, у зв'язку з погіршення екологічної ситуацією, поширеністю куріння, зміною реактивності організму людини, відбулося значне збільшення захворюваності хронічними неспецифічними захворюваннями легень (ХНЗЛ). Термін ХНЗЛ був прийнятий в 1958 р. в Лондоні на симпозіумі, скликаному фармацевтичним концерном "Ciba". Він об'єднував такі дифузні захворювання
  6.  Плацентарна недостатність Гіпоксія плоду І асфіксія немовляти
      ХРОНІЧНА фетоплацентарної недостатності Фетоплацентарна недостатність (ФПН) складає в структурі причин перинатальної смертності більше 20%. Багаторічні спостереження багатьох авторів за розвитком дітей, народжених матерями з діагностованою ФПН, дозволили прийти до висновку, що вказана патологія зумовлює не тільки різке збільшення перинатальної смертності, а й численні
  7.  Ведення і лікування хворих на ЦД під час вагітності
      Ведення вагітних з ЦД в умовах жіночої консультації включає наступні заходи: Виявлення вагітних з підвищеним ступенем ризику розвитку СД. Імовірність виникнення визначається по ряду ознак: відомості, отримані при вивчення анамнезу: обтяжений відносно СД або інших ендокринопатій, обтяжене протягом попередньої вагітності, підвищена
  8.  ЗАПАЛЬНІ ЗАХВОРЮВАННЯ ВЕРХНЬОГО ВІДДІЛУ ЖІНОЧИХ СТАТЕВИХ ОРГАНІВ.
      Гострий сальпінгоофорит (на першому місці за частотою). Інфекційний процес переходить на яєчник під час овуляції, коли після виходу яйцеклітини оголена ранова поверхню, тобто вхідні ворота для інфекції. Клініка: біль різного характеру і ступеня вираженості внизу живота, процес, як правило, двосторонній. Симптоми інтоксикації (лихоманка, озноб, слабкість, нездужання і т.д.).
  9.  ПЕРЕДРАКОВІ СТАНУ ШИЙКИ МАТКИ
      Види передракових станів шийки матки: 1) Ерозія шийки матки - це ділянка червоного кольору на шийці матки, чітко відокремлений від навколишнього блідо-рожевою поверхні, і що розташовується навколо отвору шийного каналу. Буває істинна і псевдоерозія. Ектопія шийки матки зазвичай не супроводжується жодними симптомами. Іноді великі ектопії викликають підвищену кількість слизових виділень
  10.  Надання невідкладної допомоги в умовах поліклініки
      В умовах дитячої поліклініки найбільш часто зустрічаються такі види невідкладних станів: непритомність, колапс, анафілактичний шок, судомний синдром, напад бронхіальної астми, кропив'янка, набряк Квінке, гипертермический синдром. Різні отруєння, тепловий і сонячний удар зустрічаються вкрай рідко. НЕПРИТОМНІСТЬ Непритомність - раптово виникає короткочасна втрата свідомості з
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...