загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня

Методи отримання трансгенних тварин

трансгеноз - експериментальний перенесення генів, виділених з певного геному або штучно синтезованих, в іншій геном. Тварини, в геном яких інтегрують чужорідні гени, називають трансгенними. У ряді експериментів було встановлено, що миші, що розвиваються із зиготи, в яку була введена чужорідна ДНК, містять у своєму геномі фрагменти цієї ДНК, а іноді у них відбувається і експресія чужорідних генів. У 1980 р. Дж. Гордон з співр. вперше показали можливість трансформації миші шляхом введення в пронук-Леус заплідненої яйцеклітини миші рекомбінантних молекул, що містять ген тимідинкінази (ген ТК) вірусу герпесу. Кращі результати були отримані при мікроін'єкції рекомбінантної ДНК в чоловічій крупніший пронуклеус. Метод мікроін'єкції чужорідної ДНК в чоловічій пронуклеус зиготи використовується в даний час у всіх ссавців, включаючи сільськогосподарських тварин. Створені лінії трансгенних мишей, які різнилися між собою структурою чужорідної ДНК. Мишам були введені гени: гемоглобіну кролика, Р-глобіну людини, лейкоцитарного інтерферону людини, гормону росту пацюка і людини.

Особливої ??уваги заслуговує досвід Пальмітера і співр., В якому здійснено пересадка мишам гена гормону росту пацюка. У цьому випадку промотор бактерій був непридатний. Для мікроін'єкції була створена рекомбінантна ДНК, що складається із сполучених фрагментів різних генів: промоторной частини гена - металотіонеїну МТ-1 миші і структурної частини - гена гормону росту пацюка, в якому власні промотор та ініціатор були видалені. У зиготи миші ін'єктували по 600 копій рекомбінантної ДНК. Отримано 21 нащадок. У семи мишей був виявлений чужорідний ген - ген гормону росту пацюка. Жива маса трансгенних мишенят була в 1,8 рази більше, ніж контрольних. Таких трансгенних тварин назвали супермишу. В середньому у трансгенних мишей інтегрується 25-30% копій введеної ДНК.

Успішні досліди з мишами сприяли проведенню робіт з отримання трансгенних кроликів і сільськогосподарських тварин.
трусы женские хлопок
Схема отримання трансгенних тварин в основному така ж, як і при роботі з мишами. Вона складається з наступних етапів: 1) вибір, отримання і клонування чужорідного гена; 2) отримання зигот і виявлення пронуклеусов; 3) мікроін'єкція певного числа копій генів у видиме пронуклеус; 4) трансплантація зиготи в статеві шляхи гормонально підготовленої самки; 5) оцінка народжених . тварин за генотипом і фенотипом: інтеграція чужорідної ДНК, експресія ДНК, вплив на ознаку (наприклад, висока інтенсивність росту), встановлення спадкування гена.

Найбільш важкою проблемою в дослідах з перенесення генів у тканини або організми тварин виявилася експресія внесених генів. З'ясувалося, що тільки чотири промотора (генів металотіонеїну, трансферину, імуноглобуліну, еластази) з багатьох досліджених здатні активувати приєднані до них гени.

Трансгенні кролики були отримані Р. Хаммером і Г. Бремом з співр. Вони виробляли Мікроін'єкції в пронуклеуси кроликів гена гормону росту людини. У нашій країні у відділі біотехнології вижала отримана трансгенна кролиця з інтеграцією і експресією гена гормону росту великої рогатої худоби (Л. К. Ернст та ін, 1990).

В Австралії отримали перші в світі трансгенних овець. У віці 2-4 років трансгенні вівці в 1,5 рази перевершували за масою однолітків тієї ж породи. Австралійські вчені припускають ввести вівцям і інші гени, які повинні привести до прискорення росту вовни, посиленню резистентності до хвороб.

Трансгенні свині вперше були отримані в лабораторіях Р. Хаммера (1985) і Г. Брема (1986) на основі ін'єкції гормону росту людини. У деяких таких свиней в плазмі крові відзначався високий рівень гормону росту людини. У нашій країні отримані трансгенні свині на основі ін'єкції в зиготи гена гормону росту великої рогатої худоби.

При роботі з великою рогатою худобою, для того щоб виявити пронуклеуси, застосовують ДНК-специфічні флуоресцентні забарвлення і центрифугування зигот.
У 1987 р. народився перший трансгенний теля молочно-м'ясного типу.

У порядку вдосконалення процесу трансгеноза розробляється метод запліднення яйцеклітин in vitro за допомогою мікроін'єкції одного сперматозоїда з включеною в нього чужорідної ДНК.

У перспективі передбачається отримання трансгенних тварин для виробництва нових продуктів, які можна буде виробляти в промисловому масштабі, якщо вони будуть корисні з медичної точки зору. З цією метою буде використовуватися рекомбінантна ДНК, за допомогою якої від трансгенних тварин отримуватимуть, наприклад, з коров'ячого молока, крові або печінки такі білки, як інсулін людини, інтерферон і гормони. Розробляється біотехнологія виробництва фактора згортання крові з молока трансгенних овець. Пред-

покладається, що фактор згортання, необхідний для лікування гемофілії, буде синтезуватися в клітинах молочної залози овець і переходити в молоко.

Впровадження сучасних біотехнологій - гібридизації соматичних клітин, клітинної та генної інженерії в поєднанні з ембріогенетіческой інженерією - визначає нові підходи в справі створення більш стійких до хвороб високопродуктивних порід тварин з ознаками, яких не було у вихідних порід або вони були слабовиражени. Відкриваються нові перспективи для отримання лікарських речовин: гормонів, вакцин, амінокислот, вітамінів і т. д. Синтез генів і вдосконалення методів їх введення дозволяють ввести в клітину на місце пошкоджених генів нормальні гомологи, що забезпечить лікування спадкових хвороб. Широке поширення одержать способи нейтралізації дії шкідливих генів за допомогою введення репрессоров.
« Попередня
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна" Методи отримання трансгенних тварин "
  1. Шпаргалка. Ветеринарна генетика, 2011
    ТюмГСХА, спеціальність 600 - ветеринарія, 1й курс-2й семестр Предмет і методи генетики Види ізменчівості.Віди наследственності.Клетка як генетична сістема.Роль ядра та інших органел в прередачі, збереження та реалізації спадкової інформації Морфологічна будова і хімічний склад хромосом.Каріотіп і його видові ообенності.Роль генотипу і умов середовища у формуванні фенотипу
  2. Роль біотехніки розмноження в племінній роботі, створенні нових та удосконаленні існуючих порід тварин, у прискоренні селекційного процесу, підвищенні його можливостей
    В даний час існують винятково сприятливі передумови для подальшого розвитку біотехніки розмноження тварин. Особливо великий прогрес досягнутий в розробці та вдосконаленні методів штучного осіменіння та трансплантації ембріонів. Це відкрило великі перспективи в управлінні процесами розмноження сільськогосподарських тварин: - використання біотехніки створює
  3. ЯДЕРНА ПЕРЕСАДЖУВАННЯ соматичних клітин СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКИХ ТВАРИН І непарнокопитних
    Стаття 4.11.1. Введення На першому засіданні Ad hoc групи з біотехнології (3-5 квітня 2006) Комісія з біологічним нормам запропонувала обмежити її мандат розробкою «рекомендацій про ризики для здоров'я тварин при клонуванні шляхом ядерної пересадки соматичних клітин (TNCS) сільськогосподарських тварин і непарнокопитних, в тому числі про критерії оцінки здоров'я ембріонів і
  4. ВІДБІР І ЗВЕРНЕННЯ З МІКРОМАНІПУЛІРОВАННИМІ яйцеклітину ембріон ХУДОБИ І КОНЕЙ
    Стаття 4.9.1. Введення Ні Глава 4.7., Присвячена заходам офіційного санітарного контролю, що застосовуються у міжнародній торгівлі ембріонами, отриманими in vivo, ні Глава 4.8., Що містить рекомендації щодо заходів, що стосуються ембріонів, отриманих in vitro, і овоцитов, дозрілих in vitro, не стосуються ембріонів, піддаються біопсії, операціями з биссекции, трансгенної
  5. ревматоїдний артрит. ХВОРОБА БЕХТЕРЕВА
    Ревматологія як самостійна науково-практична дисципліна формувалася майже 80 років тому у зв'язку з необходімостио більш поглибленого вивчення хвороб цього профілю, викликаної їх широким розповсюдженням і стійкою непрацездатністю. У поняття "ревматичні хвороби" включають ревматизм, дифузні захворювання сполучної тканини, такі як системний червоний вовчак, системна
  6. ПАТОГЕНЕЗ
    Шляхи проникнення мікроорганізмів у плевральну порожнину різні. Безпосереднє інфікування плеври з субплеврально розташованих легеневих вогнищ. Лімфогенне інфікування плеври може бути обумовлено ретроградним струмом тканинної рідини з глибини до поверхні легені. Гематогенний шлях має менше значення і відбувається через формування вогнищ у субплевральной шарі легкого. Пряме
  7. Надання невідкладної допомоги в умовах поліклініки
    В умовах дитячої поліклініки найбільш часто зустрічаються такі види невідкладних станів: непритомність, колапс, анафілактичний шок, судомний синдром, напад бронхіальної астми , кропив'янка, набряк Квінке, гипертермический синдром. Різні отруєння, тепловий і сонячний удар зустрічаються вкрай рідко. НЕПРИТОМНІСТЬ Непритомність - раптово виникає короткочасна втрата свідомості з
  8. Віруси грипу та грип
    Е. Д. Кільбурн (Е. D. KILBOURNE) I. ВСТУП. ГРИП - ЗАХВОРЮВАННЯ З Незмінних симптоматики, викликає Змінюється ВІРУСОМ Величезний інтерес, який притягається до сучасної вірусології до грипу і вірусів, відповідальним за його виникнення, вимагає пояснення, якщо врахувати ординарний характер симптоматики цього, зазвичай дуже помірного, інфекційного захворювання дихальних шляхів
  9. Структура вірусу грипу
    П. В. ШОППІН І Р. В. КОМПАНС (PW CHOPPIN, Я. W. COMPANS) I. ВСТУП Вивчення вірусу грипу протягом тривалого часу перебувало «а передовому рубежі структурних досліджень у вірусології. Вірус грипу одним з перших був вивчений: допомогою електронної мікроскопії (Taylor et al., 1943), і при використанні саме цього об'єкта в якості моделі було "вчинено, що деякі віруси
  10. Біологічно активні білки вірусу грипу . Гемаглютинін
    І. Т. ШУЛЬЦ (I. Т. SCHULZE) I. ВСТУП ТОЙ факт, що віруси грипу мають здатність агглютинировать еритроцити, відіграв велику роль у розвитку наших уявлень про ці інфекційних частинках. гемаглютинацію виявилася вкрай зручним методом для ідентифікації, очищення і визначення. концентрації вірусів. Крім того, з (моменту виявлення явища гемагглю-тінаціп 35 років тому
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...