загрузка...
Патологічна фізіологія / Оториноларингологія / Організація системи охорони здоров'я / Онкологія / Неврологія і нейрохірургія / Спадкові, генні хвороби / Шкірні та венеричні хвороби / Історія медицини / Інфекційні захворювання / Імунологія та алергологія / Гематологія / Валеологія / Інтенсивна терапія, анестезіологія та реанімація, перша допомога / Гігієна і санепідконтроль / Кардіологія / Ветеринарія / Вірусологія / Внутрішні хвороби / Акушерство і гінекологія
« Попередня Наступна »

Методи дослідження імунної системи

Методи суб'єктивної та об'єктивної оцінки імунної системи.

Імунний статус, принципи і рівні оцінки.

Важливо зрозуміти, що корекція иммунопатологических процесів в силу відмінностей механізмів їх розвитку не може бути однаковою і повинна передувати проведенням методів дослідження імунної системи, що дозволяють максимально точно встановити варіант иммунопатологического процесу.

Для встановлення характеру иммунопатологических змін необхідні спеціальні методи діагностики імунної системи. Ці методи виконуються в рамках спеціального розділу імунології, а саме - в рамках иммунодиагностики. Імунодіагностика - це розвивається область, вона постійно оновлюється, на зміну застарілим методам приходять більш досконалі технології і прийоми. Методи иммунодиагностики використовуються не тільки для дослідження імунної системи, інфекційних захворювань, а й для діагностики онкологічних процесів, захворювань ендокринної системи і багатьох інших. Почасти це пов'язано з залученістю імунної системи в самі різні по етіології і патогенезу захворювання в рамках єдності нейро-імуно-ендокринної регуляції гомеостазу, почасти - з використанням імунологічних підходів у виготовленні реактивів, тест-систем для дослідження практично будь-яких молекул і клітин.

Всі методи діагностики стану імунної системи можна розділити на кілька груп. Деякі методи виконуються лікарем клінічної практики, інші - фахівцями в області інструментальної діагностики, треті - фахівцями лабораторного профілю. У силу різноманітності використовуваних методів діагностика стану імунної системи здійснюється на багаторівневої основі.

1-й рівень має орієнтовне значення і призначений для констатації наявності ймовірності неадекватного функціонування імунної системи. Цей рівень - клінічний, він передбачає збір анамнезу пацієнта, вивчення його скарг і встановлення клінічних маркерів зміненої функції імунної системи шляхом фізикального огляду. Як правило, запідозрити порушення функції імунної системи можна за наявності у пацієнта частих (понад 4 разів на рік) і тривалих респіраторних інфекцій, які протікають без температурної реакції, при тривалому Субфебрилітет, зниженні або істотному збільшенні маси тіла, наявності гнійничкових захворювань шкіри, наявність ознак алергії, при порушенні функціонування шлунково-кишкового тракту, збільшенні регіонарних лімфовузлів та ін

При фізикальному огляді лікар звертає увагу на стан шкірних покривів, волосся і нігтів, стан слизових оболонок порожнини рота, на розміри і консистенцію регіонарних лімфовузлів, селезінки. За результатами даного обстеження можна припустити зміна функції імунної системи і цілеспрямовано продовжити діагностику її стану.

2-й рівень діагностики - інструментальний. Він використовується не завжди, оскільки його можливості орієнтовані на візуалізацію різних внутрішніх органів, включаючи органи імунної системи. До методів інструментальної діагностики відносять рентгенологічне, ультразвукове дослідження та суміжні з ними методи. Їх діагностична цінність пов'язана з виявленням об'ємних утворень або зміни розмірів органу, що найчастіше супроводжує пухлинні процеси (у рамках патології імунної системи - лімфопроліферативні процеси).

3-й рівень діагностики - лабораторний. Саме цей рівень дозволяє отримати максимум інформації про функціонування молекул і клітин імунної системи, що надзвичайно важливо для постановки діагнозу патології імунної системи або визначення її залученості в патологічний процес.

Для лабораторного дослідження найбільш часто використовується кров, можливо і бажано використання слини, ліквору, синовіальної рідини, сечі (можна визначити рівень деяких цитокінів) а також матеріалів, отриманих при біопсії регіонарних лімфовузлів, червоного кісткового мозку.

В принципі, всі перераховані матеріали можна умовно розділити на 2 групи - 1-я - універсальні матеріали, які досліджуються у кожного пацієнта з передбачуваним порушенням функції імунної системи (периферична кров),

2-я - спеціалізовані матеріали, досліджувані в окремих випадках і являють собою, як правило, матеріал з вогнища патологічного процесу.

Периферична кров, як біологічний матеріал для дослідження, відрізняється доступністю для взяття, але має ряд обмежень у плані достовірності та діагностичного значення одержуваної інформації.
трусы женские хлопок
Кровоносна система є лише однією з транзитних для лімфоцитів систем. У кровоносній руслі знаходиться не більше 0,5% всіх наявних в організмі лімфоцитів і їх вивчення не завжди дозволяється отримати інформацію про стан імунної системи, так як більшість процесів фізіологічної і патологічної активації цих клітин здійснюється на території органів імунної системи або різних тканин. Тому рівень значимості одержуваної інформації різний при різних патологічних станах, а для отримання достовірної інформації про стан імунної системи потрібен комплекс методів.

Серед лабораторних методів, що використовуються в цілях иммунодиагностики, особливе місце займають:

1) методи, засновані на детектировании клітин і молекул імунної системи за допомогою маркованих моноклональних антитіл (МАТ ). В основі цих методів - отримання за допомогою гібридомної технології моноклональних антитіл до конкретних молекулам. Отримані моноклональні антитіла маркують флуорохромом, радіоактивним ізотопом або іншим способом і, використовуючи основну властивість антитіл - здатність зв'язуватися з антигеном, детектируют досліджувані молекули на окремих клітинах, біопсійної зразках тканин або в інших матеріалах. Для детекції зв'язування досліджуваної молекули з МАТ потрібно спеціальної обладнання: якщо МАТ марковано флуорохромом, то реєстрацію результатів здійснюють за допомогою люмінесцентного мікроскопа, але ефективніше - за допомогою проточного лазерного цитофлуориметр. Якщо МАТ марковані радіоактивним ізотопом, то результати реєструють за допомогою лічильників іонізуючого випромінювання, або із застосуванням авторадіографії. Імуноферментний метод, метод іммуноелектронной мікроскопії, імуноцитохімії і імуногістохімії також відносяться до цієї групи методів. Впровадження цієї групи методів дозволило проводити иммунофенотипирование для визначення приналежності клітин імунної системи до тієї чи іншої субпопуляції, а також проводити якісне та кількісне визначення практично будь-яких білкових молекул і гаптенов. Тому області застосування цієї групи методів далеко переступили межі иммунодиагностики і навіть медицини;

2) серологічний метод. Цей метод також застосовується на основі взаємодії антиген-антитіло, але у випадку візуально детектіруемого взаємодії. Тобто в тих випадках, коли взаємодія антигену з антитілом проходить як специфічну, так і неспецифічну фазу, формуючи видимий неозброєним оком макромолекулярний комплекс у вигляді агглютінати або преципитатов (див. лекцію Антитіла). Цей метод переважно використовується для діагностики деяких інфекційних захворювань (для визначення рівня антигенспецифических антитіл або антигенів збудника), для визначення груп крові, а також для визначення С-реактивного білка і деяких інших прозапальних білків, циркулюючих в кровоносній руслі в досить високій концентрації. Серологічний метод простий, не вимагає спеціального обладнання, але поступається попередній групі методів в точності, відтворюваності, специфічності і роздільної здатності, тому поступово втрачає своє значення;

3) молекулярно-генетичні методи (полімеразна ланцюгова реакція - ПЛР, метод молекулярної гібридизації з використанням ДНК-, РНК-зондів, реакція секвенцірованія). В основі цих методів - дослідження окремих генів, детекція мутацій. Молекулярно-генетичні методи застосовують для підтвердження первинних (вроджених) імунодефіцитів, для визначення гаплотипу головного комплексу гістосумісності при виявленні ризику розвитку аутоімунних процесів, для виявлення в біологічному матеріалі генома мікроорганізмів та ін;

4) культурально- біологічні методи. Це також велика група методів, передбачають застосування як допоміжних реагентів клітин тварин (еритроцитів барана, наприклад), мікроорганізмів (для визначення фагоцитарної активності часто використовуються стафілококи, кандиди). Крім цього в процесі проведення дослідження застосовується культивування клітин імунної системи в лабораторних умовах. Зазвичай ця група методів застосовується для оцінки функціональної активності клітин імунної системи.

Перераховані методи в звичайному режимі иммунодиагностики використовуються для визначення імунного статусу людини. Імунний статус - це стан імунної системи в конкретний проміжок часу.
Історично склалася 2-х-рівнева система оцінки імунного статусу (див. лабораторний практикум з імунології для студентів 3 курсу, лабораторну роботу № 8, с.44). На 1-му рівні використовують найпростіші тести, що дозволяють виявити виражені зміни показників. 2-й рівень передбачає застосування більш досконалих методів і тестів, що дозволяють отримати більш повну інформацію про стан імунної системи. Проте в даний час цей підхід також поступово витісняється з практики. Це пов'язано з розробкою більш досконалих технологій, а також просуванням у вивченні основ розвитку патології імунної системи. Так, для дослідження імунного статусу все частіше застосовується іммунопатогенетіческій підхід, коли більшою мірою враховуються результати клінічного дослідження і клінічних лабораторних аналізів і з усього спектра імунодіагностичних тестів вибираються найбільш показові та специфічні:

- для діагностики імунодефіцитних станів після первинного клінічного обстеження проводять повне дослідження імунного статусу (див. лабораторний практикум з імунології для студентів 3 курсу, лабораторну роботу № 8). При підозрі на наявність первинного (вродженого) імунодефіциту діагноз підтверджують молекулярно-генетичним дослідженням, спрямованим на детекцию мутацій або відсутність конкретних генів. У разі вторинних імунодефіцитів інфекційного генезу діагноз підтверджують виявленням інфекційного агента (зазвичай в ПЛР або виявленням антигенів збудника і антитіл до них за допомогою иммунохимического або серологічного методів);

- для діагностики лімфопроліферативних процесів широко застосовуються інструментальні методи, дозволяють візуалізувати об'ємне утворення (пухлина) лімфатичної системи, досліджують імунологічний фенотип лімфоцитів крові, клітин червоного кісткового мозку та / або біоптату з виявленої пухлини. Фенотипування клітин дозволяє встановити стадію їх диференціювання. Діагностика включає також аналіз хромосом і молекулярно-генетичне дослідження маркерів ряду пухлин лімфатичної та кровотворної систем, а також секретується деякими видами пухлин продуктів (наприклад, легких ланцюгів імуноглобулінів) за допомогою різних варіантів імунохімічних методів. Показники імунного статусу в даному випадку не мають особливого діагностичного значення для підтвердження діагнозу лімфопроліферативного процесу, але необхідні для уявлення про функціонування всіх компонентів імунної системи в умовах лімфопроліферативного захворювання;

- для діагностики алергій здійснюють визначення специфічності головного патогенетичного фактора - IgE, завдяки чому встановлюється, яка речовина є для пацієнта алергеном. Для встановлення особливостей патогенезу алергії визначають концентрацію в біологічних матеріалах (крові, слині, сечі, слізної рідини, носовому секреті і інш.) Біологічно активних компонентів огрядних клітин (гістаміну, триптази, хімотріптази та ін.) Діагностичне значення має також дослідження продукції інтерлейкіну-4 і ряду інших показників. Показники імунного статусу є допоміжними критеріями, вони, як правило, не мають безпосереднього відношення до алергії;

- для діагностики аутоімунних захворювань патогенетично важливе визначення аутоантитіл певних специфичностей (ІМУНОХІМІЧНИЙ або серологічним методом), а також загального рівня імуноглобулінів різних класів, концентрації ЦВК, визначення активності системи комплементу, концентрації прозапальних білків (С-реактивного білка, церулоплазміну, ревматоїдного фактора та ін.) При діагностиці аутоімунних захворювань використовують дослідження біоптатів тканин, в яких визначають наявність фіксованих імунних комплексів або їх компонентів. Визначення інших параметрів імунного статусу не має визначального значення в діагностиці аутоімунних процесів.

Результати імунодіагностичних дослідження надалі використовують для встановлення нозологічної форми захворювання та призначення лікування. У лікуванні імунопатологічних процесів велике місце займає иммунокорригирующая терапія, або иммунокоррекция.
« Попередня Наступна »
= Перейти до змісту підручника =
Інформація, релевантна " Методи дослідження імунної системи "
  1. Лекції з імунології

    . Лекція з імунології, 2011

      Імунопрофілактика та імунотерапія. Імунітет і иммунопатология. Методи дослідження імунної системи. Методи імунокорекції. Онтогенез імунної системи Критичні періоди в розвитку імунної системи Імунопатологія 2-го типу. Механізми цитолізу. Імунні гемолітичні анемії. Хвороби, зумовлені імунними комплексами (3-й тип імунопатологічних реакцій). Характеристика
  2.  Ревматоїдний артрит. ХВОРОБА БЕХТЕРЕВА
      Ревматологія як самостійна науково-практична дисципліна формувалася майже 80 років тому у зв'язку з необходімостио більш поглибленого вивчення хвороб цього профілю, викликаної їх широким розповсюдженням і стійкою непрацездатністю. У поняття "ревматичні хвороби" включають ревматизм, дифузні захворювання сполучної тканини, такі як системний червоний вовчак, системна
  3.  ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТ
      Гломерулонефрит є основною проблемою сучасної клінічної нефрології, найчастішою причиною розвитку хронічної ниркової недостатності. За даними статистики, саме хворі на гломерулонефрит становлять основний контингент відділень хронічного гемодіалізу та трансплантації нирок. Термін "гломерулонефрит" вперше запропонував Klebs, який застосував його в "Керівництві по
  4.  СІСГЕМНАЯ ЧЕРВОНА ВІВЧАК
      Відповідно до сучасних уявлень системний червоний вовчак (ВКВ) є хронічне рецидивуюче полісиндромне захворювання переважно молодих жінок і дівчат, що розвивається на тлі генетично зумовленої недосконалості імунорегуляторних процесів, що призводить до неконтрольованої продукції антитіл до власних клітин і їх компонентів, з розвитком
  5.  СИСТЕМНА СКЛЕРОДЕРМІЯ
      - Прогресуюче полісиндромне захворювання з характерними змінами шкіри, опорно-рухового апарату, внутрішніх органів (легені, серце, травний тракт, нирки) і поширеними вазоспастична порушеннями по типу синдрому Рейно, в основі яких лежать ураження сполучної тканини з переважанням фіброзу і судинна патологія в формі облітеруючого ендартеріїту.
  6.  ПАТОГЕНЕЗ.
      Існує цілком обгрунтована точка зору, згідно з якою розвиток пієлонефриту не можна розглядати поза зв'язку зі статтю і віком. Відповідно до даної концепції виділяється три вікових піки захворюваності пієлонефритом. Перший припадає на дітей у віці до 3 років, причому дівчатка хворіють в 10 разів частіше хлопчиків. Це обумовлено особливостями будови жіночої статевої сфери і наявністю цілого
  7.  ХРОНІЧНИЙ ПІЄЛОНЕФРИТ
      У більшості випадків хронічний пієлонефрит є наслідком неизлеченного гострого і може виявлятися різноманітною клінікою. У одних хворих він протікає латентно, супроводжується лише помірним болем і лейкоцитурією. У інших же пацієнтів захворювання періодично загострюється, і процес поширюється на нові ділянки паренхіми нирки, викликаючи склероз не тільки канальців, але і клубочків.
  8.  СИСТЕМНІ ВАСКУЛІТИ
      Вузликовий періартеріїт Вузликовий періартеріїт (УП) - системний некротизуючий вас-кулит за типом сегментарного ураження артерій дрібного і середнього калібру з утворенням аневризматичних випинань. Хворіють переважно чоловіки середнього віку. Вперше описаний А.Кусмауль і К.Майер (1966). ПАТОМОРФОЛОГІЯ. Найбільш характерним патоморфологическим ознакою є ураження артерій
  9.  Хронічному бронхіті. Хронічним легеневим серцем.
      За останні роки, у зв'язку з погіршення екологічної ситуацією, поширеністю куріння, зміною реактивності організму людини, відбулося значне збільшення захворюваності хронічними неспецифічними захворюваннями легень (ХНЗЛ). Термін ХНЗЛ був прийнятий в 1958 р. в Лондоні на симпозіумі, скликаному фармацевтичним концерном "Ciba". Він об'єднував такі дифузні захворювання
  10.  Хронічного гепатиту
      У всьому світі захворювання печінки займають істотне місце серед причин непрацездатності та смертності населення. З кожним роком спостерігається зростання захворюваності гострими і хронічними гепатитами, які все, частіше трансформуються в цирози печінки. Термін «хронічний гепатит» об'єднує, рбшірний коло захворювання печінки різної етіології, які відрізняються за клінічним перебігом
загрузка...

© medbib.in.ua - Медична Бібліотека
загрузка...