Головна |
« Попередня | Наступна » | |
ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА ОНІХОМІКОЗ |
||
Мікробіологічне дослідження матеріалу, взятого з уражених нігтів, має встановити, по-перше, інфекційну природу захворювання і показати, що збудник - гриб і, по-друге, вид або хоча б рід цього гриба. Перше завдання вирішується майже завжди успішно, для цього потрібно тільки мікроскопічне дослідження матеріалу. Друге завдання вирішується рідко і з успіхом не більш ніж у половині випадків. Для встановлення виду збудника потрібно посів матеріалу на живильне середовище з наступною ідентифікацією виділеної культури. Ці методи складніше, ніж звичайна мікроскопія, і займають чимало часу. Разом з тим тільки встановлення виду збудника, отриманого в культурі, дозволить визначити етіологію оніхомікозу. Знання етіології визначає вибір системного протигрибкового засобу, тому системне лікування краще не починати, не дочекавшись відповіді лабораторії. Проте відповідь дають далеко не завжди. Винним у цьому часто виявляється лікар. Збір матеріалу Правильний збір матеріалу з уражених нігтів - запорука успішного мікробіологічного дослідження. Забираючи матеріал, не завжди захоплюють ділянки нігтя, що містять життєздатні гриби. Нежиттєздатні гриби в культурі, природно, не виростуть, і їх вигляд встановити не вдасться. Ділянка нігтя, який треба взяти, визначається формою оніхомікозу. Так, при поверхневій формі оніхомікозу слід робити зскрібки з поверхні нігтьової пластинки. При найпоширенішою дистальної подногтевой формі найбільш життєздатні гриби розташовуються під нігтьової платівкою. Матеріал, який направляють на дослідження, повинен включати не тільки обрізок нігтьової пластинки, але і зішкріб з нігтьового ложа, з-під пластинки. Крім того, слід захоплювати і області незміненого нігтя, оскільки на кордоні між ними і ураженими ділянками нігтя розташовуються найактивніші гриби. При проксимальній подногтевой формі брати матеріал важко. У цих випадках іноді, особливо якщо збираються проводити гістологічне дослідження або диференціальну діагностику, вживають біопсію нігтя, зрідка використовують бормашину. При пароніхія роблять зіскрібки з проксимального валика і з-під нього. У всіх випадках, щоб уникнути бактеріальної контамінації, перед взяттям зразка слід обробити ніготь етиловим спиртом. Мікроскопія Матеріал обробляють 10-30% розчином їдкого калі, щоб розчинити кератин, і вивчають під світловим мікроскопом. Щоб краще було видно частини міцелію цвілевих грибів, іноді до розчину їдкого калі додають чорнило. При мікроскопії виявляють ниткоподібні гіфи грибів або почкующиеся клітини (рис. 3.2.1). Таким чином, мікроскопія дає висновок тільки про грибкової природі інфекції, але не про вид гриба-збудника.
Рис. 3.2.1. Мікроскопія соськоба з нігтів, уражених Т. rubrum. Видно гіфи гриба .Культура Проводять посів матеріалу на стандартну середу Сабуро, часто з добавками антибіотиків. У діагностиці Дерматофітние інфекцій прийнято додавати в середу Сабуро циклогексимид, що пригнічує ріст грибів-контамінантів, що потрапляють з повітря. Існують готові комерційні середовища з добавками антибіотиків і циклогексаміду. Слід пам'ятати, що багато цвілеві гриби-недерматофіти і деякі види Candida не ростуть на середовищі з циклогексаміду, тому рекомендується робити посів на середу Сабуро з циклогексаміду і на середу без нього. Ідентифікацію видів зазвичай проводять при мікроскопічному дослідженні виросла культури чи шляхом пересіву на селективні середовища (рис. 3.2.2-3.2.15).
Рис. 3.2.2. Культура гриба Т. rubrum, виділеного з уражених нігтів . Отримано на середовищі Сабуро (ліворуч) і кукурудзяному агарі (справа).
Рис. 3.2.3. Культура гриба Т. mentagrophytes var. interdigitale, виділеного з уражених нігтів . Отримано на середовищі Сабуро.
Рис. 3.2.4. Культура гриба Candida albicans . Отримано на середовищі Сабуро.
Рис. 3.2.5. Культура гриба Torulopsis glabrata, виділеного з уражених нігтів . Отримано на середовищі Сабуро.
Рис. 3.2.7. Мікроморфологія Acremonium sp., Виділеного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.6. Культура гриба Ulocladium sp., Виділеного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.8. Мікроморфологія Fusarium sp., Вьщеленного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.9. Мікроморфологія Scopulariopsis sp., Виділеного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.10. Мікроморфологія Candida albicans, виділеного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.11. Мікроморфологія Altemaria sp., Виділеного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.12. Мікроморфологія Aspergillus sp., Виділеного з уражених нігтів .
Рис. 3.2.13. Мікроморфологія Ulocladium sp, виділеного з уражених нігтів .
Рис. Мікроморфологія Chaetomium sp., Виділеного з уражених нігтів .
Рис 3 15 лютого Панель поживних фед для ідентифікації дерматофітів (зліва - культура Т rubrum, праворуч - Т mentagrophytes var. mterdigitale). Зліва направо: середа Сабуро, середа Бакстера, середа Хрістенсен, кукурудзяний агарСлід врахувати, що деякі цвілеві гриби, в тому числі дерматофіти, в культурі виростають повільно, за 2-3 тижнів. Навіть при дотриманні всіх правил збору матеріалу, при хорошому устаткуванні лабораторії і високої кваліфікації її персоналу число позитивних результатів культурального дослідження дуже невелика. За даними зарубіжної літератури, відсоток позитивних досліджень не перевищує 50. Відсоток позитивних результатів у кращих вітчизняних лабораторіях ледве сягає 30. Таким чином, в 2 з кожних 3 випадків оніхомікозу його етіологію встановити не вдається. Інтерпретація отриманих результатів Оскільки різні гриби беруть неоднакову участь в поразках нігтів, результати культурального дослідження слід оцінювати теж по-різному. Виділення з уражених нігтів гриба-дерматофіти незаперечно свідчить про дерматофітозів нігтів, викликаному цим грибом. Виділення з нігтів Candida spp. саме по собі ні про що не говорить і має значення тоді, коли, по-перше, є клінічні прояви та, по-друге, псевдомицелий Candida spp. видно при мікроскопії уражених нігтів. Виділення цвілевих грибів може бути діагностично значущим тільки тоді, коли ці гриби отримано окремо, а не разом з дерматофітами, якщо вони виділені в 5 з 20 культур і якщо в патологічному матеріалі виявляється міцелій цих грибів. Ці критерії запропоновані М. English в 1976 р. Інші випадки виділення цвілевих грибів слід розцінювати або як контамінацію, або як змішану інфекцію. Для аерогенної контамінації характерний ріст колоній гриба не навколо досліджуваного матеріалу, а по всій поверхні середовища (рис. 3.2.16).
Рис. 3.2.16. Аерогенний контамінація Alternaria sp .Змішані інфекції, спричинені дерматофітами разом з іншими грибами, зустрічаються досить часто, особливо у літніх людей. Не варто дивуватися, якщо в культурі одночасно виростають колонії грибів 3 видів і навіть більше (рис. 3.2.17, 3.2.18).
Рис. 3.2.17. Змішана інфекція, викликана Т. rubrum і Curvularia sp . Виділена з уражених нігтів на кукурудзяному агарі.
Рис. 3.2.18. Змішана інфекція Scopulariopsis sp. і Т. mentagrophytes var. interdigitale . |
||
« Попередня | Наступна » | |
|
||
Інформація, релевантна "ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА оніхомікоз" |
||
|